[發明專利]一種作為影像學檢查早期阿爾茨海默病示蹤劑的短肽

有效

• 申請號: 201811382043.5
• 申請日: 2018-11-20
• 公開（公告）號: CN109384831B
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 高慧玲;張憲成;張曉雨;王占友;鐘曼麗
• 申請（專利權）人: 東北大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K51/08
• 代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901
• 代理人: 張海青

本發明公開了一種作為影像學檢查早期阿爾茨海默病示蹤劑的短肽，包含的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。該短肽分子量小，特異性高，親和性高，是一種與Cu?Aβ₄₂金屬蛋白復合物結合的結合肽，作為示蹤劑用，提高通過影像學技術早期診斷阿爾茨海默病時預測的準確度高。

技術領域

本發明涉及一種作為影像學檢查早期阿爾茨海默病示蹤劑的短肽。

背景技術

阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)作為老年癡呆的一種常見類型的神經系統退行性疾病，主要臨床特征是進行性的記憶障礙，認知功能損傷以致人格改變及語言障礙等精神癥狀，近年隨著人口老齡化，AD發病趨勢逐年遞增。AD的病理性特征改變之一是β淀粉樣蛋白(β-amyloid peptide，Aβ)沉積形成的細胞外老年斑，Aβ的細胞毒性及其腦內沉積是導致AD腦內神經元死亡的重要原因。Aβ沉積與腦結構和神經功能改變有關，且與輕度認知損害或阿爾茨海默病的病理改變相一致。Aβ1-42是腦內老年斑的主要成分，其寡聚體的形成具有極強的神經毒性。銅離子作為機體重要的微量元素之一，在Aβ的異常聚集和沉積中也扮演了非常重要的角色。研究表明，Aβ是一個擁有多金屬鍵合位點的金屬蛋白，其N端的6，13，14位組氨酸殘基是金屬離子鍵合的關鍵位點。Aβ1-42的序列含有組氨酸His-13位點與人血清白蛋白Cu²⁺結合基序有驚人的相似之處。Aβ并不是自發地聚集，而是與腦中的過量金屬(如Cu²⁺，Zn²⁺)發生了一種年齡依賴性的作用，它使Aβ沉淀為富含金屬的斑塊。Aβ-Cu的聚合物具有加劇Aβ沉淀，進而加劇AD病程。因此對Aβ產生和聚集的監測可以作為AD發病的診斷依據之一。目前，對于阿爾茨海默病的早期檢測與診斷方法，包括影像學檢查，影像學技術的發展對于阿爾茨海默病的診斷具有重要意義，目前常用的方法為PET顯像。PET顯像是利用同位素示蹤原理，顯示示蹤劑分布和變化的一項功能成像技術，主要有18F-脫氧葡萄糖(18F-FDG)PET和Aβ-PET。18F-FDG PET是用來檢測腦組織中的葡萄糖代謝率，并認為葡萄糖代謝率與認知功能相關；Aβ-PET：是一項與Aβ結合的示蹤劑成像技術。但此技術也存在著如下的缺點，如18F-FDG PET顯像，葡萄糖代謝是非特異性指標，多種原因如缺血、炎癥反應等均可以影響葡萄糖代謝，可能與阿爾茨海默病病程無直接關系。

噬菌體表面展示技術是一種能夠在絲狀噬菌體表面展示大量多肽和蛋白質文庫的分子多樣性技術,從噬菌體展示的文庫中幾乎可以篩選出針對所有靶標存在高度親和性和特異性的多肽、蛋白質及抗體,這些篩選的多肽及抗體已經被廣泛應用于臨床疾病的診斷和治療。本專利通過噬菌體表面展示技術篩選出針對Cu-Aβ₄₂結合序列特異性短肽，一方面可以作為早期阿爾茨海默病影像學檢查示蹤劑，另一方面也可作為潛在的治療藥物以減緩腦內Aβ的聚集。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種作為影像學檢查早期阿爾茨海默病示蹤劑的短肽。

本發明采用如下技術方案：

一種作為影像學檢查早期阿爾茨海默病示蹤劑的短肽，包含的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。

進一步的結果表明該短肽是Cu-Aβ₄₂金屬蛋白復合物特異性結合肽。

并這個短肽是由噬菌體隨機展示十二肽庫篩選所得。

公布了如上述作為影像學檢查早期阿爾茨海默病示蹤劑的短肽在早期診斷阿爾茨海默癥中的用途。

Cu-Aβ₄₂金屬蛋白復合物結合肽的篩選方法，包括如下步驟：

(1)Cu-Aβ₄₂金屬蛋白復合物制備與ESR波普分析：