[發明專利]一種生物堿類化合物在線富集與分析方法

有效

• 申請號: 201811360444.0
• 申請日: 2018-11-15
• 公開（公告）號: CN109541055B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發明（設計）人: 申欽鵬;夏建軍;劉春波;趙輝;劉志華;李源棟;唐石云;楊鈺婷;段沅杏;王昆淼;趙楊;張鳳梅;司曉喜;陳應莊
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08
• 代理公司: 北京市領專知識產權代理有限公司 11590
• 代理人: 陳有業;任文娟

本發明涉及一種生物堿類物質的在線富集與分析方法，包括以下步驟：A、使第一流動相攜帶樣品經過弱陽離子吸附柱，將樣品中的生物堿類物質和中性物質吸附在該柱內，其余組分隨第一流動相排出；B、改用第二流動相流過該吸附柱所吸附的中性物質被洗脫而隨該第二流動相排出并丟棄，生物堿類物質仍保留在該吸附柱內；C、改用第三流動相流過該吸附柱，將所述生物堿類物質洗脫并用稀釋相稀釋后進入第一收集柱內，其中生物堿類物質被吸附在該第一收集柱內，第三流動相則排出，如此積累直至該第一收集柱內吸附有足夠的生物堿類物質；D、改向所述第一收集柱內供應第四流動相，將所積累的生物堿類物質洗脫出來，并隨第四流動相進入分析色譜柱進行分析。

技術領域

本發明涉及分析化學領域，具體涉及一種生物堿類化合物的在線富集與分析方法。

背景技術

隨著人們對實際樣品研究日益深入，常常面對諸多復雜多變的基質，這個樣品分析帶來諸多困難，如何排除基質干擾及非目標成分的干擾成為分析技術研究的熱點。通常的研究者預先使用液液萃取，固相萃取等手段預先去掉樣品中的基質及非目標成分，然后再行色譜分析，雖然能有效的實現樣品中目標物的分析，但是分析過程通常需要大量的人工操作，除了增加研究者負擔外，也容易引入不可控的誤差。因此發展全自動在線樣品處理及分析系統成為發展的新趨勢。

煙草中具有包括煙堿、降煙堿、新煙堿、煙草特有亞硝胺等各種生物堿類物質，實踐中需要對這些生物堿類物質進行分析。但煙草中的化學成分多達6000 多種，除了上述生物堿類物質之外，還含有諸如酮類、醛類、醚類和酯類等中性物質，以諸如咖啡酸、綠原酸的酸性物質。在常規的色譜分析中，這些中性物質和酸性物質會干擾生物堿類物質的分析，因此有必要設法排除它們的干擾。

另外，有些特定的生物堿類物質的含量是痕量級的，在常規色譜分析中，這些痕量級物質隨樣品中的大量溶劑以及輸送樣品的流動相共同進入色譜柱中后，其對應的色譜峰跟溶劑或流動相對應的色譜峰相比過于微弱，也影響分析精度。

本發明旨在解決上述問題。

發明內容

本發明提供了一種生物堿類物質的在線分析方法，該方法包括以下步驟：

A、用水含量不低于80％的第一流動相攜帶樣品經過吸附柱15，該吸附柱15 為弱陽離子吸附柱，將樣品中的生物堿類物質和中性物質吸附在柱內，樣品中其余組分隨第一流動相排出并丟棄；然后，

B、停止供應第一流動相，并使甲醇含量不低于80％的第二流動相流過吸附柱15，使得吸附柱15內所吸附的中性物質被洗脫而隨該第二流動相排出并丟棄，生物堿類物質仍保留在該吸附柱15內；然后，

C、停止供應第二流動相，并使包含酸性有機溶劑的第三流動相流過該吸附柱15，將所述生物堿類物質洗脫，并隨第三流動相一起被稀釋相稀釋后進入第一收集柱21內，該第一收集柱21為反相捕集柱，其中生物堿類物質被吸附在該第一收集柱21內，第三流動相則排出并丟棄；如此積累，直至該第一收集柱 21內吸附有足夠的生物堿類物質；

D、停止供應第三流動相和稀釋相，并向所述第一收集柱21內供應第四流動相(可選自水或乙腈，且可選地可以向其中添加0.01wt％的三乙胺)，將所積累的生物堿類物質洗脫出來，并隨第四流動相進入分析色譜柱20，進行分析。

優選地，設置第二收集柱22，用于與第一收集柱21交替操作，即第一收集柱進行步驟D的時候，第二收集柱22進行步驟C，第一收集柱21進行步驟C的時候，第二收集柱22進行步驟D。

優選地，通過十通閥17來實現第二收集柱22與第一收集柱21的交替操作。

其中，該樣品中含有有包括煙堿、降煙堿、新煙堿、煙草特有亞硝胺在內的各種生物堿類物質，以及諸如酮類、醛類、醚類和酯類等中性物質，以及少量諸如咖啡酸、綠原酸等、酸性物質。

本發明的有益效果：