[發明專利]一種用于抑制TCF12基因的siRNA分子

有效

• 申請號: 201811357715.7
• 申請日: 2018-11-15
• 公開（公告）號: CN109337907B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 高賽楠;張玉泉;蘇敏;卞婷婷
• 申請（專利權）人: 南通大學附屬醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海申浩律師事務所 31280
• 代理人: 賈師英

本發明公開了一種用于抑制TCF12基因的siRNA分子，由如下序列的正義鏈和反義鏈組成：正義鏈是5’?CAGUGAUAUACAUAGUUUANn?3’，反義鏈是5’?UAAACUAUGUAUAUCACUGNn?3’。其中，正義鏈和反義鏈中的N相同或者不同，并且各自獨立地是胞嘧啶C、尿嘧啶U、鳥嘌呤G、腺嘌呤A、脫氧胞嘧啶dC、脫氧鳥嘌呤dG、脫氧腺嘌呤dA或脫氧胸腺嘧啶dT；n代表N的個數，n是0、1或2。本發明的siRNA分子可用于制備治療卵巢癌的藥物。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種用于抑制TCF12基因的siRNA分子及其在制備抗腫瘤藥物中的用途。

背景技術

卵巢癌是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，發病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌而列居第三位。卵巢癌中以上皮癌最多見，其次是惡性生殖細胞癌，卵巢上皮癌患者死亡率卻占各類婦科腫瘤的首位，對婦女生命造成嚴重威脅。由于卵巢的胚胎發育、組織解剖及內分泌功能較復雜，早期癥狀不典型，術前鑒別卵巢腫瘤的組織類型及良惡性相當困難，卵巢上皮癌極易發生轉移和侵襲，患者術中發現腫瘤局限于卵巢的僅占30％，早期診斷是一大難題。卵巢惡性腫瘤尤其是上皮癌難以早期發現，病因不明，除遺傳性卵巢癌外，沒有一級預防措施，目前主張早診早治，爭取早期發現病變，有關早期診斷的研究正在進行中。

TCF12基因是堿性螺旋-環-螺旋(basic helix-loop-helix，bHLH)E蛋白家族成員，可以識別E-box序列CANNTG(Thorsen等人，BMC genomics.2011,12:505；Chen等人，JBiol Chem.2013,288:9001-9010)。該基因編碼的蛋白在多種組織和細胞中表達，包括骨骼肌、在胸腺、B細胞和T細胞，并可能通過與其他bHLH E-蛋白形成異源二聚參與調控種系特異性基因的表達。該基因有多種不同的轉錄剪接變異體，但這些變異體全長的性質尚未確定。

TCF12基因編碼產物(TCF12，也稱HTF4或Heb)是螺旋-環-螺旋(HLH)蛋白家族的一個成員(Zhang等人，Nucleic Acids Res.1991,19:4555；Hu等人，Mol.Cell Biol.1992,12,1031-1042)。根據組織分布、反應能力、和DNA結合特異性(Massari等人，Mol.CellBiol.2000,20,429-440)，HLH蛋白被分為七類。I類蛋白，由TCF3(E12，E47)、TCF4(E2-2)和TCF12(HTF4)基因編碼，由于其DNA(E-box)結合能力也被稱為E蛋白。這些蛋白質在許多組織中廣泛表達并可形成同源或異源二聚體。II類蛋白，包括MyoD、myogenin和TWIST，可以與I類成員形成異源二聚體，并顯示組織特異性表達模式。III蛋白，包含一個亮氨酸拉鏈結構域和HLH結構域，并包括Myc轉錄因子家族。第IV類成員包括一個蛋白家族如Mad、Max和Mxi，可與Myc形成二聚體。V類蛋白質缺乏基本區域，因此不能直接結合DNA。I類和II類成員為顯性負因子。VI類成員在其基本區域有一個脯氨酸，VII類蛋白按其HLH-PAS結構域劃分，成員包括如缺氧誘導因子1α和芳香烴受體。TCF12可以和肌形成蛋白、E12和ITF12形成同源寡聚體或雜低聚物，并能與PTF-1、RUNX1T1[12]和TCF調節子ID1(Jones-Mason等人，Immunity.2012,36:348-361)。

TCF12已被證明在神經元分化中起作用，在一些腫瘤中表達上調，如神經膠質瘤、黑色素瘤、結腸癌、口腔癌、膽囊癌及胰腺癌。有研究報道TCF12與腫瘤轉移和浸潤關系密切(Lee等人，J Biol Chem.2012,287:2798-2809.)。研究提示，TCF12可以作為抑制腫瘤的靶向分子之一。