[發明專利]一種鹽酸法舒地爾中5-異喹啉磺酸甲酯的檢測方法

有效

• 申請號: 201811352646.0
• 申請日: 2018-11-14
• 公開（公告）號: CN109374812B
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 李寧;陳云建;劉世成;李劍峰;高宏濤
• 申請（專利權）人: 昆藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89;G01N30/72;G01N30/86;G01N30/34;G01N30/06
• 代理公司: 北京元中知識產權代理有限責任公司 11223
• 代理人: 王明霞;另婧

本發明屬于藥物化學分析領域，具體地說，涉及一種鹽酸法舒地爾中5?異喹啉磺酸甲酯的檢測方法。所述的方法為采用高效液相色譜?質譜系統，分別將5?異喹啉磺酸甲酯對照品溶液和鹽酸法舒地爾供試品溶液進行檢測。本發明的檢測方法首先采用高效液相色譜法進行組分的分離，該色譜條件能夠確定鹽酸法舒地爾供試品溶液中5?異喹啉磺酸甲酯色譜峰的位置，并將5?異喹啉磺酸甲酯色譜峰與相鄰的其他組分的色譜峰有效分離開來，且運行時間短；然后采用本發明的質譜條件進行高分辨一級質譜進行定量，其能夠檢測到ppm級別的5?異喹啉磺酸甲酯，定量限可達ng/ml水平，因而能夠對鹽酸法舒地爾中的5?異喹啉磺酸甲酯進行有效控制。

技術領域

本發明屬于藥物化學分析領域，具體地說，涉及一種鹽酸法舒地爾中5-異喹啉磺酸甲酯的檢測方法。

背景技術

鹽酸法舒地爾是一種新型異喹啉磺胺類衍生物，能夠通過增加肌球蛋白輕鏈磷酸酶的活性擴張血管，降低內皮細胞的張力，改善腦組織微循環，保護缺血腦組織，同時可拮抗炎癥因子，保護神經抗凋亡，促進神經再生。鹽酸法舒地爾及其注射液于2004年在中國上市，主要用于蛛網膜下腔出血后腦血管痙攣等引起的缺血性腦血管疾病癥狀的改善。

雜質控制是藥品質量控制的重要內容之一，藥品中的雜質是否能被全面準確地控制，直接關系到藥品的質量的可控性與安全性。因此，規范地進行雜質研究，并將其控制在一個安全、合理的限度范圍內，對藥物的臨床安全具有重要的意義。鹽酸法舒地爾的合成路線會生成多種雜質，5-異喹啉磺酸甲酯是其中具有基因毒性作用的雜質，其可能在生產過程中傳遞到鹽酸法舒地爾成品中，為保證產品的安全性和可靠性，需要對其進行相應的控制和檢測。基因毒性雜質一般允許的含量限度很低，在ppm的水平，通常的檢測方法難以達到檢測限和定量限。目前，針對鹽酸法舒地爾中雜質的檢測通常是對一般物質的檢測。如《中國藥典》2015年版二部記載的鹽酸法舒地爾中有關物質測定方法為HPLC法，具體為：有關物質取本品，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含0.3mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。精密量取對照溶液5ml，置100ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為靈敏度溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以1.0％(v/v)三乙胺水溶液(用鹽酸調節pH至7.0)-甲醇(50：50)(v/v)為流動相；檢測波長為275nm。理論板數按鹽酸法舒地爾峰計算不低于3000。鹽酸法舒地爾峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。取靈敏度溶液20μl，注入液相色譜儀，使主成分色譜峰的信噪比應不小于10。精密量取供試品溶液與對照品各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的5倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質峰，單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.1倍(0.1％)(w/w)，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積(1.0％)(w/w)。供試品溶液色譜圖中小于靈敏度溶液主峰面積的色譜峰忽略不計(0.05％)(w/w)。

經研究發現，在實際操作過程中，上述方法存在以下不足：

(1)此條件下5-異喹啉磺酸甲酯和鹽酸法舒地爾分離效果較差，色譜峰基本重疊在一起，不能達到基線分離；

(2)此條件下5-異喹啉磺酸甲酯吸收極弱，不能檢出。

針對上述缺陷，申請人開發了HPLC法測定鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質的方法(李開鳳等，HPLC法測定鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質，海峽藥學，2018年02期)，該方法采用高效液相色譜法，色譜柱：Thermo Scientific Hypersil GOLS C8(4.6×150mm，3μm)，流動相：0.1％甲酸溶液-乙腈(98∶2)等度洗脫；檢測波長：275nm，流速：0.9m L·min^-1；進樣量：20μL；柱溫：30℃。該方法的定量濃度為0.337μg/ml，檢測限濃度為0.084μg/ml，仍然較高，靈敏度不夠，對鹽酸法舒地爾中ppm水平的5-異喹啉磺酸甲酯不能有效檢測。

有鑒于此特提出本發明。

發明內容