[發明專利]一種諾維氏梭菌培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 201811345056.5
• 申請日: 2018-11-13
• 公開（公告）號: CN109439576B
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 柴同杰;孟德志;楊玲玲
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/08;A61P31/04;C12R1/145
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 薛鵬喜

1.一種諾維氏梭菌培養基，其特征在于，由基礎培養基、血紅素溶液和維生素K1溶液按體積比1000ml：8-12ml：4-6ml配制而成；

每1000ml基礎培養基中包含：胰蛋白胨8-12g、酵母浸粉8-12g、磷酸鉀4-6g、葡萄糖8-12g、糊精0.5-1.5g、牛肉粒7-15g；

所述維生素K1溶液由如下方法制備而成：

將1g維生素K1溶于99ml無水乙醇中，過濾除菌；

所述血紅素溶液由如下方法制備而成：

將0.5g血紅素溶于1mol/L的氫氧化鈉1mL中，加蒸餾水至100mL，滅菌。

2.根據權利要求1所述的諾維氏梭菌培養基，其特征在于，由基礎培養基、血紅素溶液和維生素K1溶液按體積比1000ml：10ml：5ml配制而成；

每1000ml基礎培養基中包含：胰蛋白胨10g、酵母浸粉10g、磷酸鉀5g、葡萄糖10g、糊精1g、牛肉粒12g。

3.根據權利要求1所述的諾維氏梭菌培養基，其特征在于，所述諾維氏梭菌培養基的pH為7.8-8.4。

4.權利要求1-3任一項所述的諾維氏梭菌培養基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將胰蛋白胨、酵母浸粉、磷酸鉀、葡萄糖、糊精和牛肉粒溶解于蒸餾水中，高溫滅菌，配制成基礎培養基；

(2)將基礎培養基冷卻至室溫，然后向基礎培養基中加入血紅素溶液和維生素K1溶液，即制備得到諾維氏梭菌培養基。

5.權利要求1-3任一項所述的諾維氏梭菌培養基在諾維氏梭菌快速増菌培養中的應用。

6.權利要求1-3任一項所述的諾維氏梭菌培養基在制備諾維氏梭菌疫苗中的應用。

7.一種諾維氏梭菌的培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

將諾維氏梭菌接種至權利要求1-3任一項所述的諾維氏梭菌培養基中，在37-43℃條件下進行厭氧培養。

8.根據權利要求7所述的培養方法，其特征在于，所述厭氧培養的氣體環境為：80％氮氣、8％氫氣和12％二氧化碳。