[發明專利]一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法

在審

• 申請號: 201811341621.0
• 申請日: 2018-11-12
• 公開（公告）號: CN109430045A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 別同德;趙仁慧;何華綱;蔣正寧;陳甜甜;王玲;高德榮;張勇
• 申請（專利權）人: 江蘇里下河地區農業科學研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/06;C12Q1/18
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產權代理有限公司 11467
• 代理人: 馮燕平

1.一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，首先將抗白粉病小麥品種和感白粉病小麥品種的雜交，再利用化學誘變劑但不限于甲基磺酸乙酯對雜交種子進行誘變，誘變劑的量為但不限于0.8%EMS磷酸緩沖液。

2.根據權利要求1所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

（1）將抗白粉病小麥品種與感白粉病小麥品種雜交，收獲雜交種子；

（2）用化學誘變劑處理雜交種子，進而用自來水沖洗，直至在培養皿中露白；

（3）將露白后的雜交種子種到溫室大棚中生長形成M₁代誘變群體，同時種植的還有抗白粉病親本、感白粉病親本及和未誘變處理的F₁植株作為對照；

（4）在成株期利用白粉病孢子在大棚內播撒接種；

（5）當感白粉病親本充分發病后，分單株考察發病情況；

（6）嵌合體的分類，分為高度嵌合型突變體、低度嵌合型突變體、中度嵌合型突變體；

（7）將出現嵌合型突變的莖蘗的穗子收獲后，在下一代（M₂）種成穗行，大棚內種植模式同上一代；苗期進行白粉菌接種，篩選感白粉病但抗病基因標記陽性的小麥單株。

3.根據權利要求2所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，步驟（2）中所述化學誘變劑為甲基磺酸乙酯，誘變劑的量為但不限于0.8%EMS磷酸緩沖液。

4.根據權利要求2所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，步驟（2）中誘變時間為8小時。

5.根據權利要求2所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，步驟（5）中所述的發病情況植株確認如下：

當某個單株的某個莖蘗葉片上出現沿葉脈方向的條狀白粉病孢子堆，而其它莖蘗葉片均表現正常抗病性狀時，確定該單株是抗病和感病性狀嵌合的突變體；此時，感病親本的葉片上白粉菌孢子堆呈無規則散點狀分布于全部葉片，抗病親本和正常F₁單株的葉片上不出現白粉菌孢子堆。

6.根據權利要求2所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，步驟（6）中所述高度嵌合型突變體表現為條狀白粉病孢子堆寬度大于1/4葉寬；所述低度嵌合型突變體表現為條狀白粉病孢子堆寬度小于1/6葉片寬度；所述中度嵌合型突變體表現為條狀白粉病孢子堆寬度介于1/4和1/6之間。

7.根據權利要求2所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，步驟（7）中所述篩選感白粉病的小麥單株的方法為：

利用抗白粉病基因緊密連鎖標記或功能標記鑒定，如果是小麥遺傳背景內不交換的野生物種染色體，則用抗病基因所在外源染色體專化性標記對感病單株的DNA進行鑒定，當標記顯示陽性時，說明該單株為攜帶了喪失抗白粉病功能的感病突變體。

8.根據權利要求2所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，在誘變當代（M₁）植株的同一張葉片上即可觀察到抗病和感病嵌合癥狀，表現為白粉菌孢子堆在葉片上延葉脈方向呈條狀分布。

9.根據權利要求7所述的一種嵌合型小麥抗白粉病基因突變體的創制方法，其特征在于，抗病基因為顯性遺傳。