[發明專利]一種水稻秸稈降解菌系的擴大培養方法

在審

• 申請號: 201811338427.7
• 申請日: 2018-11-12
• 公開（公告）號: CN111172051A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 蘇振成;班允赫;張衛建;李旭;王秀娟;王健;劉威;張惠文
• 申請（專利權）人: 中國科學院沈陽應用生態研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/38;C12R1/05;C12R1/025
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

本發明涉及農業生物技術領域，具體涉及一種水稻秸稈降解菌系的擴大培養方法。將穩定的秸稈降解菌系按照8?10wt％的接種量接種于4?10L新鮮的富集培養基中，室溫靜置培養直至培養基中的濾紙條崩解；將上述4?10L培養物接種于40?100L富集培養基中靜置培養，至培養基中的濾紙條崩解即為擴培完成；本發明以富集培養基為菌系擴大培養培養基，逐級放大培養即可獲得降解菌群穩定的大量水稻秸稈降解菌系，可用于還田水稻秸稈的腐解。

技術領域

本發明涉及農業生物技術領域，具體涉及一種水稻秸稈降解菌系的 擴大培養方法。

背景技術

我國是農業大國，每年有大量作物秸稈被閑置或焚燒，不僅浪費資 源，也造成了嚴重的空氣污染。水稻是我國三大糧食作物之一很多地區 都有種植，秋收后面臨冬季氣溫低、茬口期短等實際問題，嚴重影響種 植區水稻秸稈還田的實施，秸稈還田不但可以有效增加土壤有機質含量、 提高土壤肥力和改善土壤結構，而且在一定程度上還解決了農用廢棄秸 稈的再利用及環境污染問題。但是，因富含纖維素的秸稈結構復雜，在 還田土壤中腐解緩慢并影響下茬作物的種植，秸稈還田的方式不易被廣 大農戶所接受，推廣亦困難。

水稻秸稈降解菌系可以加快還田秸稈的腐解，為水稻秸稈還田方式 的推廣和實施帶來希望。目前，市場上的秸稈腐解劑多是由幾種純菌復 配而成的復合菌系，原始菌種來源不同，菌種之間的協同作用效果欠佳， 撒施到還田秸稈中后容易與土著菌發生拮抗作用，秸稈腐解的效果并不 理想。近年來，許多研究以腐爛秸稈、腐爛落葉、朽木、爛草、動物糞 便、堆肥、鋸末、食用菌栽培下腳料、麥田土、樹林土、多年秸稈還田 土壤、菜園土、草原土等多種樣品為菌源，以秸稈為目標降解物，經馴 化和富集培養得到了多組秸稈降解菌系，這類菌系組成菌種在自然環境 中經長期自然選擇和進化，菌種間已能相互適應，協同進化，也能協同 發揮秸稈降解作用，降效果明顯好于人為復配的菌劑。但降解菌系菌種 組成的復雜性決定了其擴大培養的難度，菌系中包含幾十甚至是幾百種 及以上微生物，其中又包含可培養和不可培養菌種，不可能將組成菌種 全部分離出來擴大培養后再復配，只能將所有組成菌共同培養，并且在 培養過程中確保所有功能菌不丟失。因而，很難按照傳統的擴大培養方 法多來擴培降解菌系。

發明內容

本發明目的在于提供一種水稻秸稈降解菌系的擴培方法。

為實現上述目的，本發明采用技術方案為：

一種水稻秸稈降解菌系的擴大培養方法，

1)將穩定的秸稈降解菌系按照8-10wt％的接種量接種于4-10L新鮮的 富集培養基中，室溫靜置培養直至培養基中的濾紙條崩解；

2)將上述4-10L培養物接種于40-100L富集培養基中靜置培養，至培 養基中的濾紙條崩解即為擴培完成；

所述富集培養基配方為每升培養基中含有下列成分：K2HPO4 1.0-3.0g，(NH4)2SO4 1.0-3.0g，NaNO3 1.0-3.0g，MgSO4·7H2O 0.5-1.5g,FeSO4·7H2O 0.01-0.05g,,KCl0.5-1.5g,丙酮酸鈉0.3-1.2g, 酵母浸出粉0.5-1.5g,蛋白胨0.5-1.5g,可溶性淀粉0.5-1.5g,秸稈粉 5-10g,D-山梨醇0.5-1.5g,微量元素混合液1-3ml,鈣溶液1-3ml，濾紙 條2張，調pH值7.0～7.5。

所述培養富集培養基中的微量元素混合液配方如下(g/L)：ZnSO4·7H2O 1.5-3.5g，CoCl2·6H2O 0.15-0.50g，Na2MoO4·2H2O 0.10-0.50g， MnSO4·H2O 1.5-3.0g，CuSO4·5H2O 0.15-0.35g，H3BO3 0.3-0.12g， NiCl2·6H2O 0.06-0.15g，KI 0.06-0.15g；

所述鈣溶液為CaCl₂的水溶液，濃度為3％。