[發明專利]一種在線色譜MALDI集成裝置

有效

• 申請號: 201811336901.2
• 申請日: 2018-11-12
• 公開（公告）號: CN109541053B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 劉穎超;張權青;李順祥;楊芃原;賈濱
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/60;G01N30/72
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 張磊

本發明涉及一種在線色譜MALDI集成裝置。在線色譜MALDI集成裝置包括MALDI上樣靶板，密封蓋板以及在MALDI上樣靶板上加工形成的半敞開式色譜柱空腔和上樣通道。本發明在MALDI上樣靶板表面加工若干條半敞開式色譜柱空腔，密封蓋板與空腔配合，填入固定相后，構成用于樣品分離的色譜柱，實現色譜與MALDI的在線集成。樣品在色譜流動相帶動下，經上樣通道進入色譜柱進行在線分離。分離完成后，移走密封蓋板，對靶板上已分開的樣品烘干，樣品表面覆蓋基質，再次烘干，隨即將靶板放入MALDI質譜進行分析。本發明實現色譜與MADLI分析的集成化，簡化MALDI分析過程中前處理操作，利于在痕量大分子物質檢測過程中，提高檢測準確性。

技術領域

本發明涉及分析檢測儀器領域，特別是涉及一種在線色譜MALDI集成裝置。

背景技術

MALDI是應用于質譜技術中的一種軟電離方式，通過在樣品表面覆蓋基質，由短周期脈沖激光束轟擊，使樣品離子化。此種方式可用于常規離子化方式不容易解離的一些生物大分子，如大分子蛋白，肽段等，且離子化效率較高。此外MALDI離子化方式，允許樣品中存在一定量的在預處理過程中存在的一些緩沖劑和鹽類雜質，對樣品的包容性強。因此，MALDI質譜在臨床分析、環境監測、生命科學等領域發揮著越來越重要的作用。

色譜（Chromatography）是一種應用于物質分離分析的手段。按照流動相的物質狀態不同分為液相色譜（Liquid Chromatography，LC）和氣相色譜（Gas Chromatography，GC）。液相色譜（LC），顧名思義，流動相為液態，樣品因在流動相和固定相中配比不同，即不同樣品在固定相中的保留時間不同，最終實現分離，按照不同的順序到達檢測器。隨著高效液相色譜（HPLC）和超高效液相色譜（UPLC）的發展，色譜的分離能力已達到新的高度，分析速度、靈敏度等都進一步提到，在各分析領域也得到廣泛應用。

液相色譜與質譜聯用（LC-MS）有效結合了液相色譜強大的物質分離能力以及質譜鑒定檢測能力。目前常見的是LC與ESI-MS聯用，然而ESI-MS為連續進樣，且對生物大分子的離子化效率不高，因而此種聯用不利于痕量大分子的檢測。鑒于此種缺陷，本發明通過創新設計，將LC與 MALDI集成，實現LC與MALDI-MS的聯用，簡化樣品預處理的過程，提高檢測效率，實現痕量大分子物質大批量有效分析。

發明內容

為解決以上問題，本發明的目的在于提供一種在線色譜分離MALDI集成裝置，實現LC與MALDI靶板集成，將液相分離和MALDI痕量大分子檢測的優勢相結合，簡化樣品預處理的過程，提高檢測效率。

本發明提供的一種在線色譜MALDI上樣集成裝置，包括MALDI上樣靶板、密封蓋板以及在MALDI上樣靶板上加工形成的半敞開式色譜柱空腔和MALDI上樣通道；所述MALDI上樣靶板正面一側均勻加工有若干條半敞開式色譜柱空腔，配合使用密封蓋板，在半敞開式色譜柱空腔中填入色譜固定相，構成色譜柱，實現MALDI與色譜結合，每條半敞開式色譜柱空腔的兩側布置有MALDI上樣通道；MALDI上樣通道一方面為上樣靶板上的色譜柱提供柱塞位置，另一方面用于色譜流動相帶樣品流入及廢液流出；待樣品在色譜柱上完全分離開；使用時，首先將密封蓋板移走，烘干上樣靶板上的樣品及色譜固定相，其次在樣品表面覆蓋基質，再次烘干，之后便可將上樣靶板放入MALDI 質譜中進行分析。

本發明中，所述MALDI上樣靶板材料為導電塑料或者不銹鋼。

本發明中，所述MALDI上樣靶板尺寸可根據用戶所用MALDI儀器進行自定義，與MALDI-MS相匹配即可。

本發明中，所述MALDI上樣靶板上的半敞開式色譜柱空腔數量范圍在1 ~ 500條。

本發明中，所述所述MALDI上樣靶板上半敞開式色譜柱空腔可為長方體或圓柱形，截面積0.0001 um² ~ 25 mm²，其他形狀亦可。