[發明專利]一種牛皮膠原蛋白的提取方法

有效

• 申請號: 201811333910.6
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109355336B
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 蔣宇;王小清
• 申請（專利權）人: 貴州梵凈山生態農業股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/78;C07K1/14
• 代理公司: 貴州派騰知識產權代理有限公司 52114
• 代理人: 谷慶紅

本發明涉及生物膠原蛋白制備的技術領域，具體涉及一種牛皮膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：S1脫脂脫毛：將牛皮浸入水中，控制溫度下，加入脫毛脫脂復合酶制劑，恒溫處理，瀝出，用清水洗凈；S2免疫處理：將牛皮置于碳酸鈉溶液中，維持pH為7.8?8.5，溫度為20?25℃條件下，轉動15?20min后，取出瀝干，加水高速攪拌制成糊狀，用高壓均質機處理后，制成牛皮漿；S3提取：向牛皮漿中加入有機酸溶液調節pH，加入活化復合酶制劑，在自然溫度下攪拌5?7h后，固液分離，得提取液備用；S4純化：將提取液經離心分離取上層液，得膠原蛋白溶液；本發明方法提高了膠原蛋白的純度和得率，并且縮短了提取時間。

技術領域

本發明涉及生物膠原蛋白制備的技術領域，具體涉及一種牛皮膠原蛋白的提取方法。

背景技術

膠原蛋白是動物細胞合成的一種天然生物高分子，廣泛存在于動物的皮、骨、軟骨、牙齒、肌腱、韌帶和血管中，是結締組織極其主要的結構蛋白，起著支持結構器官、保護機體的作用。膠原蛋白具有穩定的性質，一般的加工溫度及短時間加熱都難使其分解，因此難被人體吸收，食用利用率較低。

目前，常用的提取方式有酶降解法、酸提取法、堿提取法和重組DNA提取法。酸堿法因強酸強堿反應劇烈、設備腐蝕嚴重，已不適用于工業化應用。重組DNA提取效果佳但工序繁雜且成本高；相比之下，酶法效果好、環境友好。

如CN201610121685.4公開了一種復合酶法水解制備牛皮膠原蛋白的方法，利用復合酶水解制備牛皮膠原蛋白的工藝，以獲取所需的蛋白質產品。經過牛皮浸泡清洗，蒸煮酶解，脫色脫苦，過濾，離子交換，濃縮，滅菌，噴霧干燥，過篩工序。該發明省去傳統制作工藝復雜程序，降低能耗和成本，能直接使用牛皮制備膠原蛋白，獲得的膠原蛋白質量好，分子量位于3050-3300Da之間，苦味顯著降低。

又如CN201710089525.0公開了一種酶法提取牦牛皮膠原蛋白的方法，本發明涉及提取膠原蛋白領域，包括以下工序完成：脫毛→粉碎→脫脂→酶解→純化。該發明以牦牛皮為原料，發明了一種酶法提取牦牛皮膠原蛋白的方法，旨在得到性能優良的膠原蛋白，提高牦牛皮的產品價值和經濟效益；本發明經過脫毛、脫脂后利用酶制劑水解制備的膠原蛋白純度高、色澤均勻、無異味，提取過程綠色環保、工藝簡單，并能擴牦牛皮的利用范圍，增加牦牛皮的利用價值。

但現有技術脫毛脫脂過程造成膠原蛋白損失較多，且提取前處理一般先脫毛后脫脂，增加了工藝，提取溫度要求苛刻，這限制了酶法的發展，而大多數研究者均是致力于如何優化酶組合提取效果，但對于如何降低脫毛脫脂過程中膠原蛋白的損失率以及如何降低提取溫度要求的研究較少。

發明內容

本發明為解決上述技術問題，本發明提供了一種牛皮膠原蛋白的提取方法。

具體按照以下技術方案實現：

一種牛皮膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：

S1脫脂脫毛：將牛皮浸入牛皮質量(2-2.5)倍的水中，控制溫度在35-40℃下，加入牛皮質量0.001-0.002的脫毛脫脂復合酶制劑，恒溫處理2-3h，瀝出，用清水洗凈；

S2免疫處理：將牛皮置于牛皮質量(1.2-1.5)倍的碳酸鈉溶液中，維持pH為7.8-8.5，溫度為20-25℃條件下，轉動15-20min后，取出瀝干，加入牛皮重量(1-1.3)倍的水高速攪拌制成糊狀，用高壓均質機處理后，制成牛皮漿；

S3提取：向免疫處理后的牛皮漿中加入有機酸溶液調節pH為6-6.8，然后加入牛皮質量0.002-0.004倍的活化復合酶制劑，在自然溫度下以100-150r/min攪拌5-7h后，利用壓濾機進行固液分離，得提取液備用；

S4純化：將提取液經離心分離取上層液，得膠原蛋白溶液。