[發明專利]一種具有農藥降解活性的植物乳桿菌、其制備方法及應用

在審

• 申請號: 201811329631.2
• 申請日: 2018-11-09
• 公開（公告）號: CN109266587A
• 公開（公告）日: 2019-01-25
• 發明（設計）人: 張和平;陳永福;李常坤
• 申請（專利權）人: 內蒙古農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01N63/02;A01P3/00;A61K35/747;A61P1/00;A61P39/02;A23L29/00;A23L33/135;A23L5/20;C11D7/40;C11D7/60;C12R1/25
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所(普通合伙) 11305
• 代理人: 黃綠雯

本發明提供一種具有農藥降解活性的植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)P9，其保藏號為CGMCC No16401。植物乳桿P9能降解有機磷農藥氧化樂果、甲拌磷和樂果，且具備良好的霉菌抑制性、特別對甜瓜疫霉菌表現出明顯的抑菌效果。因此，它可作為蔬果清潔劑或農用生物制劑而具備降解有機磷農藥、清除有機磷農藥殘留和抑制霉菌活性的效果。其具有耐酸性、耐膽汁酸性、耐過氧化氫酶和蛋白酶的穩定性使得它能存活于包括人在內的動物的胃腸器官內，因此可作為食品或食品添加劑，是具有益生菌活性的益生菌。

【技術領域】

本發明屬于生物技術領域。更具體地，本發明涉及一種具有農藥降解活性的植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)，還涉及這株具有農藥降解活性的植物乳桿菌的制備方法，以及所述植物乳桿菌的應用。

【背景技術】

現代農業中，化學農藥是農田防治病蟲害的最佳選擇，因其效果好、作用快、不易失活、易保存和價格低等優點而廣受人們的青睞。化學農藥主要是一類有機或無機的化學試劑，包括除草劑、殺蟲劑、殺線蟲劑、殺菌劑、植物生長調節劑和土壤熏蒸劑等。2013年，我國年農藥用量中有效成分超過31.10萬噸，其中70％以上是有機磷、有機氯、氨基甲酸酯類和除蟲菊酯類農藥。然而，實際應用過程中只有5％的農藥起到作用，其余部分則進入環境中。

近年來，農藥污染及農藥中毒事件已經成為嚴重危害人體健康的公共安全問題。食品及其原材料中農藥殘留檢測結果依舊出現很多農殘超標案例。2014年，羅赟等對綿陽市城區及其周邊六個縣的300 份蔬菜、水果和糧食樣品進行抽查發現，有機磷農藥未檢出的合格率僅為74.44％。2015年，Chen等發現810份茶葉樣品中有機磷農藥的檢出率為29％，平均含量達93μg/kg。我國己禁止高毒有機磷農藥的生產銷售，但農作物和相關食品中農藥檢出率依然很高。有機磷農藥的長期超量使用，致使農作物中的殘留量嚴重超標，成為引起食品安全事件的重要隱患。

長期食用有機磷農藥超標食物，逐漸積累造成無明顯表象癥狀的慢性中毒，從而引起的毒副作用不容忽視。有機磷農藥進入機體后，其磷酸根與體內乙酰膽堿酯酶活性中心的絲氨酸結合形成磷酸化的膽堿酯酶，使乙酰膽堿酯酶失活，導致乙酰膽堿在體內蓄積。同時，有機磷農藥引起細胞損傷和氧化應激，產生過氧離子或自由基(O^2-、 HO₂·和·OH等)并進入線粒體，從而造成機體代謝和能量轉換的紊亂。研究表明，甲拌磷、樂果和乙酰甲胺磷等有機磷農藥中毒可造成遺傳毒性，影響甲狀腺、肝和腎功能，損傷生殖、內分泌和免疫系統。目前，針對有機磷農藥慢性中毒，仍沒有理想的醫療方案，因此，通過飲食預防和緩解農藥慢性中毒癥狀，已成為食品安全防控領域的研究熱點。

微生物可通過礦化作用、酶促、非酶促或共代謝等方式將農藥及其有毒、有害副產物轉化為二氧化碳、水等無害物質。乳酸菌(Lactic Acid Bacteria,LAB)作為安全的食品級微生物，已被人類食用上千年，而且乳酸菌的免疫調節、抗腫瘤、降血脂等諸多功能已被公認。使用植物乳桿菌(L.plantarum)來降解有機磷農藥的污染，已經在體內和體外得到證明。本發明中的植物乳桿菌主要來至于傳統發酵乳制品，其安全性是有保證的。

【發明內容】

本發明的目的是基于自然選擇的方法提供一株具有農藥降解活性的植物乳桿菌。

進一步地，本發明還提供這株植物乳桿菌農藥降解活性的評價方法，及其在作為食品或食品添加劑的使用。

為了實現上述目的，本發明提供一種具有農藥降解活性的植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)P9，該菌株已于2018年8月30日在北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為CGMCC No16401。

進一步地，本發明還提供具有農藥降解活性的植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)P9的選育方法，所述選育方法包括下述步驟：