[發(fā)明專利]一種宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液及其制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811309119.1 | 申請(qǐng)日: | 2018-11-05 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN109566597A | 公開(kāi)(公告)日: | 2019-04-05 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 董明珠;宋莉莉;潘新;劉世紅;盧家堃 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 北京世紀(jì)勁得生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號(hào): | A01N1/02 | 分類號(hào): | A01N1/02 |
| 代理公司: | 北京愛(ài)普納杰專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 王玉松 |
| 地址: | 101200 北京市平*** | 國(guó)省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 宮內(nèi)膜干細(xì)胞 保護(hù)液 復(fù)蘇 制備 低分子右旋糖苷 中藥提取物 肝素鈣 海藻糖 罌粟堿 血清 凍存 保存 | ||
1.一種宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液,其特征在于,所述保護(hù)液包括如下重量份的各成分:
1-5份的肝素鈣、20-40份的低分子右旋糖苷、1-2份的罌粟堿、5-10份的海藻糖、800-1000份的水和4-6份的中藥提取物;
所述中藥提取物由如下重量份的成分制備而成:
2.權(quán)利要求1所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液,其特征在于,所述中藥提取物由如下重量份的成分制備而成:
3.如權(quán)利要求1所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液,其特征在于,所述中藥提取物的提取方法包括如下步驟:
1)取配方量的青葉膽洗凈、粉碎,放置于50-70℃溫水中減壓浸提兩次,每次浸提1-2h,青葉膽與50-70℃溫水的固液比為1:10-12,浸提真空度為0.7-0.9Mpa,合并各次浸提液,得青葉膽浸提液;
2)取配方量的香附、蔓荊子和薤白放置于濃度為40-60%的乙醇溶液中超聲30-40min,香附、蔓荊子和薤白的總重量與40-60%的乙醇溶液的固液比為1:40-60,超聲頻率為40-60KHz,得超聲提取液;
3)將步驟1)獲得的青葉膽浸提液與步驟2)獲得的超聲提取液合并,混合均勻,濃縮干燥至粉末,即得中藥提取物。
4.如權(quán)利要求1所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液,其特征在于,所述保護(hù)液還包括重量份數(shù)為4-10份的維生素B6、2-4份的氯化鎂和10-20份的N-乙酰半胱氨酸。
5.如權(quán)利要求1所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液,其特征在于,所述保護(hù)液還包括重量份數(shù)為0.4-0.6份的超氧化物歧化酶、3-7份的LpxC-1和0.8-1.2份的檸檬酸鋅。
6.如權(quán)利要求1所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液,其特征在于,所述保護(hù)液還包括重量份數(shù)為4-8份的磷酸氫二鉀、1-5份的妥布霉素和0.2-1份的甘油。
7.一種權(quán)利要求1所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括如下步驟:
S1:取1/2配方量的水,將配方量的肝素鈣以4-8s/d的速度加入攪拌狀態(tài)的水中,滴加完畢后繼續(xù)以400-500r/min的速度攪拌25min,用細(xì)菌過(guò)濾器過(guò)濾,得肝素鈣水溶液;
S2:將配方量的低分子右旋糖苷、罌粟堿和海藻糖放置于剩余配方量的水中以800-1000r/min的速度攪拌4-6min,用細(xì)菌過(guò)濾器過(guò)濾,獲得混合水溶液;
S3:將步驟S1獲得的肝素鈣水溶液和步驟S2獲得的混合水溶液混合均勻后加入配方量的中藥提取物,再次混合均勻,冰水浴降至0℃,即得。
8.權(quán)利要求1-7任一所述的宮內(nèi)膜干細(xì)胞保護(hù)液在保存宮內(nèi)膜干細(xì)胞中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,每mL所述保護(hù)液中保存的宮內(nèi)膜干細(xì)胞的數(shù)量為7~9×105個(gè)。
10.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述保護(hù)液的工作溫度為-20~-80℃。
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