[發(fā)明專利]一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811308621.0
• 申請日: 2018-11-05
• 公開（公告）號: CN111139211B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發(fā)明（設計）人: 鮑杰;侯偉亮;姚瑞苗;張宏森;金慈;張建
• 申請（專利權）人: 山西合成生物研究院有限公司
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 王衛(wèi)彬

1.一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，包括以下步驟：

(1)對木質纖維素原料進行預處理和糖化制備包含抑制物水解液；

(2)對預處理原料進行脫毒移除抑制物并糖化制備無抑制物包含水解液；

(3)在包含抑制物木質纖維素水解液中培養(yǎng)氧化葡糖桿菌，而后轉入無抑制物水解液中繼續(xù)培養(yǎng)，依此交替轉接直至菌株發(fā)酵性能達到穩(wěn)定；

(4)在合成培養(yǎng)基和木質纖維素水解液中進行高效發(fā)酵驗證。

2.根據(jù)權利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，在所述的步驟(1)中，預處理方法為干法稀酸預處理，預處理條件為：木質纖維素固體與稀硫酸液體的質量比為1:1-2:1，硫酸用量為木質纖維素原料干重的1％-10％，處理溫度為150-220℃，處理時間為1-20min。

3.根據(jù)權利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，在所述的步驟(1)中，預處理物料中有毒的抑制物組分包括糠醛，羥甲基糠醛，乙酸等。

4.根據(jù)權利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，在所述的步驟(2)中，脫毒方法為固態(tài)生物法移除抑制物，脫毒條件為：預處理物料pH調至4.0-7.0，含水量為50％-60％，接入樹脂枝孢霉Amorphothecaresinae ZN1在脫毒反應器內于25-35℃，0.01-1.5vvm的通氣量條件下脫毒12-120h。

5.根據(jù)權利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，在所述的步驟(1)和(2)，糖化操作中木質纖維素原料的固體含量為5-30％(質量百分比)，糖化水解液中包含糖類有葡萄糖和非葡萄糖碳源(木糖，阿拉伯糖，甘露糖和半乳糖)。

6.根據(jù)權利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，在所述的步驟(3)中，菌株培養(yǎng)條件為：轉速為100-250rpm，溫度為25-30℃，培養(yǎng)時間為12-36h。

7.根據(jù)權利要求1所述的一株高效利用非葡萄糖碳源的氧化葡糖桿菌適應性進化方法及其應用，其特征在于，在所述的步驟(3)中，適應性進化獲得新菌株已于2017年10月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC),保藏編號為CGMCCNo.14801。