[發明專利]一種用于提取體液中胞外囊泡的提取劑及其提取方法

有效

• 申請號: 201811302563.0
• 申請日: 2018-11-02
• 公開（公告）號: CN109355258B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 孔關義;趙立波;謝琪琪;李鴻艷;陳亞慶
• 申請（專利權）人: 北京恩澤康泰生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/078
• 分類號: C12N5/078
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.一種基于鹽析法提取體液中胞外囊泡的方法，其特征在于，將提取劑和體液混合形成待提取體系，鹽析后離心后即得；

所述提取劑由氯化鈣和聚乙二醇組成，在所述待提取體系中，所述氯化鈣的濃度為1-2wt%；所述聚乙二醇的濃度為1-5wt%；

所述鹽析是通過將所述提取劑和體液樣本充分混合并在0-25℃下靜置孵育1-30分鐘完成的；所述孵育時，體系的pH值控制在6-7；

在鹽析后，所述離心的條件為5000g-10000g離心5-10min；所述離心時以0.20-0.25μm濾膜進行離心過濾。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取劑以提取溶液的形式提供，以去離子水作為溶劑，所述體液與所述提取溶液的體積比為1：（0.5-2）。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述孵育時，孵育溫度為4-10℃；和/或，孵育時間為10分鐘。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述濾膜為0.22μm。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述體液包括血漿、血清、尿液；所述體液在所述待提取體系中的濃度范圍為10-95%。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述體液包括血漿、血清、尿液；所述體液在所述待提取體系中的濃度范圍為10-95%。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述體液在所述待提取體系中的濃度為80-95%。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述體液在所述待提取體系中的濃度為80-95%。