[發明專利]一種激活增多卵泡的制劑及其應用

在審

• 申請號: 201811292953.4
• 申請日: 2018-11-01
• 公開（公告）號: CN109439618A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 顧軍;顧帥;蘭丹
• 申請（專利權）人: 多能干細胞再生醫學科技（廣州）有限公司
• 主分類號: C12N5/075
• 分類號: C12N5/075
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 吳偉文

本發明涉及卵巢組織體外培養技術領域，公開了一種激活增多卵泡的制劑及其應用，該制劑由P13K/Akt/mTOR通路激活劑和/或PTEN抑制劑SF1670組成，所述P13K/Akt/mTOR通路激活劑為5?15μM他汀類藥物，所述PTEN抑制劑為20?50μM的SF1670。通過使用該制劑能夠達到現有技術的激活增多卵泡效果，有助于臨床上卵泡體外激活劑的發展和選擇，同時該制劑的使用也為他汀類藥物開拓了一種新的技術應用領域。

技術領域

本發明涉及卵巢組織體外培養技術領域，特別是一種激活增多卵泡的制劑及其應用。

背景技術

在哺乳動物中，生殖細胞的生長和成熟是一個受到激素精細調節的過程。這些激素包括來自下丘腦的促性腺激素和生殖器官自身產生的激素和生長因子等。在雌性哺乳動物體內，卵泡是構成卵巢的基本功能單位，由位于中央的卵子及外圍一層或多層顆粒細胞構成。按照卵泡中卵母細胞的不同生長發育階段，可以分為原始卵泡，初級卵泡，次級卵泡，腔卵泡，排卵前卵泡。原始卵泡是卵巢中處于靜息狀態的卵泡庫，在哺乳動物出生前或出生后，其數量是固定的，人每個卵巢中的原始卵泡大約有400，000左右。在卵巢的生長發育過程中，卵巢中的原始卵泡不停的被激活，進入生長期經過初級卵泡和次級卵泡階段。女性出生時，從月經初潮開始，周期性的排卵使這些卵泡逐漸消耗，直至剩余1000-2000個時，原始卵泡不再發育，女性也隨之進入了絕經期。由于原始卵泡在第一定數量后，就不再發育，因此，即使B超檢查中見不到任何的卵泡，也不代表卵巢中不存在原始卵泡。而只要有原始卵泡的存在，使用原始卵泡體外激活技術就可以將其從休眠狀態喚醒，令其繼續發育并排卵。

目前的增多卵泡的體外激活技術主要是應用信號通路激活劑體外處理卵巢組織以激活其中的原始卵泡，其對于治療卵巢早衰病人具有重要意義。目前的激活增多卵泡的制劑的主要包括應用PI3K信號通路激活劑bpV和740-YP和mTOR信號通路激活劑磷脂酸和普萘洛爾的組合使用。然而，由于上述專利所涉及的激活劑種類過于復雜，且有的體外處理時間需要48小時，在臨床應用時病人必須要接受兩次手術才能完成治療過程，因此，如何找到新的激活方法來縮短激活時間，使該項治療通過一次手術完成，減少病人痛苦，操作方便快捷，將是該技術的一次革命性的飛躍。

發明內容

本發明的目的在于提供一種激活增多卵泡的制劑及其應用，該制劑由P13K/Akt/mTOR通路激活劑他汀類藥物和/或PTEN抑制劑SF1670組成，通過使用該激活增多卵泡的制劑能夠達到現有技術激活效果，同時該制劑的使用也為他汀類藥物開拓了一種新的技術應用領域。

技術方案：激活增多卵泡的制劑，由P13K/Akt/mTOR通路激活劑和/或PTEN抑制劑SF1670組成，所述P13K/Akt/mTOR通路激活劑為5-15μM他汀類藥物，所述PTEN抑制劑為20-50μM的SF1670。

上述的他汀類藥物為洛伐他汀、普伐他汀、阿托伐他汀中的一種

上述制劑在制備人卵巢皮質培養液中的應用。

上述人卵巢皮質培養液，包括以下組分：1)P13K/Akt/mTOR通路激活劑他汀類藥物和/或PTEN抑制劑SF1670；2)基礎培養液。

上述人卵巢皮質培養液，所述基礎培養液為：MEMa細胞培養液，其中添加丙酮酸鈉0.23mM、人血清白蛋白10wt.％。

上述人卵巢皮質培養液，試劑組成為：溶液I：基礎培養液；試劑I：P13K/Akt/mTOR通路激活劑，為5-15μM的他汀類藥物，按照30mL基本培養液的劑量分別預先分裝；試劑II：PTEN抑制劑，為20-50μM的SF1670，按照30mL基本培養液的劑量分別預先分裝。

非診斷治療目的的人卵巢皮質培養液的應用方法，步驟如下：

1)取人卵巢組織于10mL-15mL細胞培養液，分離卵巢皮質并切割成1mm³的小塊；