[發明專利]一種檢測肺炎支原體的試劑盒

在審

• 申請號: 201811285987.0
• 申請日: 2018-10-31
• 公開（公告）號: CN109342724A
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發明（設計）人: 廖朝暉
• 申請（專利權）人: 廖朝暉
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立;曲璟秋

本發明涉及一種檢測肺炎支原體的試劑盒，所述試劑盒包括R1試劑和R2試劑，所述R1試劑包括第一緩沖物、第一穩定劑、第一保護劑第一防腐劑、增濁劑和水，所述R2試劑包括肺炎支原體抗原、聚苯乙烯膠乳微球、第二緩沖物、第二穩定劑、第二保護劑、第二防腐劑和水。本發明具有高靈敏度高、檢測速度快、結果穩定、線性范圍廣、重復好且易于標準化和標本采集容易且標本用量少等優點，能夠為臨床肺炎支原體感染診斷提供一種早期、快速、靈敏度高和特異性好的新方法。

技術領域

本發明涉及一種體外診斷試劑領域，尤其是一種檢測肺炎支原體的試劑盒。

背景技術

肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae,MP)是兒童社區獲得性肺炎的重要病原之一，MP感染大概占兒童社區獲得性肺炎感染的10％-30％，多發生在家庭、社區、學校和野營區等人口密集的公眾場所。MP感染具有季節性，多發在秋季，主要通過飛沫傳播，大多數MP感染具有局限性，是否出現臨床感染癥狀取決于粘附在宿主呼吸道表面的MP能否被清除，但是仍然有3％-13％引起臨床癥狀，其主要癥狀是干咳，體溫在37.7±1.0℃，并可持續1-3周，可伴有咽痛和肌肉酸痛，缺乏特異性的臨床特征，而且大約每3-7年會暴發流行1次。因此，早期、快速、準確診斷MP和耐藥性MP對指導臨床用藥、疾病轉歸及預后起到至關重要的作用。

目前實驗室診斷MP感染的方法分為三類：分離培養及鑒定、分子生物學診斷和血清學診斷。分離培養法是診斷MP感染的金標準，但是培養條件要求高，培養周期長(10-14d)，一般用于科研和臨床回顧性分析，對MP早期診斷意義不大，現在已經很少運用于臨床診斷；分子生物學包括：巢式PCR、實時定量PCR、環介導等溫擴增反應(LAMP)技術、依賴核酸序列的擴增技術(NASBA)、實時熒光核酸恒溫擴增檢測技術(SAT)和復合PCR等技術，分子生物學技術靈敏度和特異性高，適用于早期的臨床診斷，但是，除了分子生物學本身的假陽性率高和標本易污染等缺點外，研究發現在健康人群中MP攜帶率高(0.1％-13.5％)，并且感染后DNA可在呼吸道存活時間長(7周-7個月時間)，因此，即使運用分子生物學方法檢測到MP DNA陽性也不能診斷MP感染需結合臨床進行判斷。此外還受不同標本類型、采樣部位、采樣人和實驗室采用實驗方法等因素影響，目前還沒有統一標準，給實驗室診斷方法的評估帶來一定困難；血清學方法是我國診斷MP感染常用方法，實驗方法包括補體結合實驗(CFT)、明膠顆粒凝集試驗(PA)和ELISA等方法。CFT整體敏感度較差，檢測抗體的特異性不高，而且易出現交叉反應，造成假陽性，目前臨床上已經很少使用。PA實驗和ELISA的靈敏度和特異性都明顯優于CFT，被一些國家廣泛應用于臨床，并且與分子生物學結果有較好的一致性，但是，商品化的血清學方法檢測MP感染都是手工法，操作比較繁瑣和耗時長，其敏感度還受實驗室條件和實驗人員的技術等影響。本實驗使用的標本類型是末梢全血或者血清，成本低，對兒童的創傷更少，標本更容易采集，從醫學的心理學角度來說比抽血測定MP更容易被患兒的家屬接受。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種肺炎支原體片段、包含其的試劑盒及試劑盒的使用方法,本發明能夠運用在全自動生化儀，具有高靈敏度高、檢測速度快、結果穩定、線性范圍廣、重復好且易于標準化和標本采集容易且標本用量少等優點，能夠為臨床肺炎支原體感染診斷提供一種早期、快速、靈敏度高和特異性好的新方法，從醫學的心理學角度來說比抽血測定MP更容易被患兒的家屬接受。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：一種檢測肺炎支原體的試劑盒，所述試劑盒包括R1試劑和R2試劑，所述R1試劑包括第一緩沖物、第一穩定劑、第一保護劑第一防腐劑、增濁劑和水，所述R2試劑包括肺炎支原體抗原、聚苯乙烯膠乳微球、第二緩沖物、第二穩定劑、第二保護劑、第二防腐劑和水。