[發明專利]一種人類2型糖尿病相關基因突變篩查的組合引物及應用

在審

• 申請號: 201811276265.9
• 申請日: 2018-10-30
• 公開（公告）號: CN109295210A
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發明（設計）人: 鄶斌;毛燕;李潔璇;操立超;侯俊笛
• 申請（專利權）人: 深圳市萬眾基因轉化醫學研究院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 合肥中博知信知識產權代理有限公司 34142
• 代理人: 李德勝

本發明公開了一種人類2型糖尿病相關基因突變篩查的組合引物及應用，涉及基因檢測技術領域，包括針對人類2型糖尿病在chr1、chr2、chr3、chr4、chr6、chr7、chr10、chr11、chr12、chr15、chr16、chr19、chr20染色體上相關基因的35個SNP位點的特異性引物，并將所述組合引物應用到人類2型糖尿病相關基因突變篩查試劑盒的制備。本發明采用自主研發的試劑，其價格要遠遠低于進口試劑，使得檢測成本也大大降低；并且進行一次本發明的方法至少可以檢測30份樣品，從而使其可以被廣泛地用于2型糖尿病相關基因的普查工作。

技術領域：

本發明涉及基因檢測技術領域，具體涉及一種人類2型糖尿病相關基因突變篩查的組合引物及應用。

背景技術：

糖尿病是一組以高血糖為特征的內分泌代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，導致血糖過高，出現糖尿，進而引起脂肪和蛋白質代謝紊亂。糖尿病時長期存在的高血糖，導致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經的慢性損害、功能障礙。根據發病機制不同，糖尿病可以被分為1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠糖尿病和其他類型糖尿病。中國是全球糖尿病患者第一大國，據統計2015年糖尿病病患人數高達1.096億人，130萬人死于糖尿病及其并發癥，而如果不加干預，我國糖尿病患者數量將在2040年上升至1.54億，對我國的醫療衛生產生嚴重的負荷。

2型糖尿病占糖尿病總發病率的90％，存在家族發病傾向，將近一半的患者都有糖尿病家族史。目前已經發現多種基因突變可以導致2型糖尿病，如胰島素基因、胰島素受體基因、葡萄糖激酶基因、線粒體基因等。

單核苷酸多態性(Single Nucleotide Polymorphisms，SNP)是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態性，是人類可遺傳變異中最常見的一種。SNP在人類基因組中廣泛存在，平均每500～1000個堿基對中就有1個，估計其總數可達300萬。數量龐大的SNP位點與生命的多種進程都密切相關，尤其是在疾病的鑒定方面SNP起著重大的作用。目前已經發現ENPP1，TCF7L2，HIGD1C，KCNQ1，TPCN2，FABP2，CLOCK，PPARG，ALPK1，FAM78B，PAX4，TRIB3，PRKAA2，ZFAND6，CCDC33，NOS3，APOE，GC，PDE4B，CYBA，CDKAL1，KCNJ11，UCP2，RBMS1，NFE2L2，FTO，ARNTL2，ZNF239等2型糖尿病相關基因的35個SNP位點rs1044498，rs11196205，rs11196218，rs12304921，rs151290，rs1551305，rs1799883，rs1801260，rs1801282，rs2074379，rs2074388，rs2116519，rs2233580，rs2295490，rs2746342，rs2903265，rs2930291，rs3918188，rs405509，rs4506565，rs4588，rs4655595，rs4673，rs4712523，rs5215，rs5219，rs660339，rs6718526，rs6721961，rs7193144，rs7901695，rs7958822，rs9326506，rs9465871，rs997509。而目前針對這些基因位點多態性的研究主要是Sanger測序法，該方法只能針對某一個樣本的某一段區域進行檢測，檢測效率低，成本高。

基于此，本發明提供了一種人類2型糖尿病相關基因突變篩查的組合引物及其應用方法。

發明內容：

本發明所要解決的技術問題在于提供一種檢測便捷、準確率高、經濟實惠的2型糖尿病相關突變基因位點的檢測方法；通過多組基因引物對樣品DNA進行實時定量PCR擴增，并通過各位點的熔解曲線與標準熔解曲線相比較獲取其基因型，最終通過各SNP位點對2型糖尿病的貢獻系數計算出患病的比率。

本發明所要解決的技術問題采用以下的技術方案來實現：

本發明的一個技術方案如下：