[發(fā)明專(zhuān)利]一種生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體及其在Bt蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811257972.3
• 申請(qǐng)日: 2018-10-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109517117B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉名茗;胡森華;陳雅露;禹云莉;李雨欣;程巧連;陳秀華;劉凡
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C08F289/00
• 分類(lèi)號(hào): C08F289/00;C08F220/56;C08F222/38;C08F220/54;C08F220/14;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/68
• 代理公司: 武漢開(kāi)元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 徐紹新

1.一種生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體，它是模擬Bt Cry1Ac蛋白與煙草天蛾中腸刷狀緣膜囊受體鈣粘蛋白Bt-R1之間的分子識(shí)別機(jī)制，以人工合成的丙烯酰胺-多肽單體與其它共存單體以及生物素標(biāo)記單體反應(yīng)后得到的聚合物納米顆粒，所述多肽的氨基酸序列為NITIHITDTNNK，所述共存單體為丙烯酰胺類(lèi)和/或丙烯酸酯類(lèi)化合物，所述生物素標(biāo)記單體為N-(3-甲基丙烯酰氨丙基)-D-生物素胺。

2.一種生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）人工合成丙烯酰胺-多肽單體，所述多肽的氨基酸序列為NITIHITDTNNK；

2）以過(guò)硫酸銨為引發(fā)劑、四甲基乙二胺為催化劑，將丙烯酰胺-多肽單體與其它共存單體以及生物素標(biāo)記單體反應(yīng)得到聚合物納米顆粒，所述共存單體為丙烯酰胺類(lèi)和/或丙烯酸酯類(lèi)化合物，所述生物素標(biāo)記單體為N-(3-甲基丙烯酰氨丙基)-D-生物素胺。

3.如權(quán)利要求2所述生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體的制備方法，其特征在于：所述丙烯酰胺-多肽單體的摩爾量占丙烯酰胺-多肽單體、共存單體和生物素標(biāo)記單體總摩爾量的2-30％。

4.如權(quán)利要求2所述生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體的制備方法，其特征在于：所述生物素標(biāo)記單體的摩爾量占丙烯酰胺-多肽單體、共存單體和生物素標(biāo)記單體總摩爾量的2-8％。

5.如權(quán)利要求2所述生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體的制備方法，其特征在于：所述聚合反應(yīng)在氮?dú)獗Ｗo(hù)氛圍下，于4～40℃條件下進(jìn)行。

6.生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體在Bt蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)中的應(yīng)用，所述生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體是按權(quán)利要求2-5任何一項(xiàng)所述的方法制備的。

7.一種Bt蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，包含酶標(biāo)板、生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體稀釋液、洗滌液、封閉液、酶標(biāo)工作液、顯色液、終止液，其中，所述生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體是按權(quán)利要求2-6任何一項(xiàng)所述的方法制備的。

8.如權(quán)利要求7所述的Bt蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述封閉液為含有牛血清白蛋白的碳酸鹽緩沖液，所述牛血清白蛋白的重量濃度為2.0%。

9.如權(quán)利要求7所述的Bt蛋白酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述生物素標(biāo)記聚合物納米顆粒模擬抗體稀釋液的濃度為20 μg/mL。