[發明專利]核酸檢測試紙、制備方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201811252140.2
• 申請日: 2018-10-25
• 公開（公告）號: CN109321633B
• 公開（公告）日: 2020-08-25
• 發明（設計）人: 何曉聰;徐峰;楊媛媛;劉智;屈治國
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 覃婧嬋

1.一種核酸檢測試紙，其包括，

支撐墊，

結合墊、檢測墊、吸水墊依次布置在所述支撐墊上，結合墊與檢測墊部分重合，吸水墊與檢測墊部分重合，

對照區，其經由對照探針溶液加載在檢測墊上形成，

檢測區，其經由捕獲探針溶液加載在檢測墊上形成，

可溶鹽柱，設在檢測墊上的固態可溶鹽柱位于結合墊和檢測區之間，可溶鹽柱經由鹽溶液在檢測墊加熱蒸發以在其孔隙中析出鹽結晶形成，所述鹽溶液包括SSC緩沖液、氯化鈉溶液、檸檬酸鈉溶液、醋酸鈉溶液、PBS緩沖液和/或碳酸鹽緩沖液。

2.根據權利要求1所述的核酸檢測試紙，其中，所述結合墊中包含檢測探針-顯色顆粒復合物，所述檢測探針-顯色顆粒復合物經由顯色顆粒膠體溶液與檢測探針溶液混合反應形成。

3.根據權利要求2所述的核酸檢測試紙，其中，所述檢測探針溶液由檢測探針粉末、醋酸緩沖液、TCEP和超純水組成，對照探針溶液由對照探針粉末、鏈霉親和素溶液、PBS緩沖液和無水乙醇組成，捕獲探針溶液由捕獲探針粉末、鏈霉親和素溶液、PBS緩沖液和無水乙醇組成。

4.根據權利要求3所述的核酸檢測試紙，其中，所述SSC緩沖液包括氯化鈉和檸檬酸鈉。

5.根據權利要求2所述的核酸檢測試紙，其中，所述檢測墊包括硝酸纖維素膜，顯色顆粒膠體溶液為納米金膠體溶液，所述納米金顆粒粒徑為13nm。

6.根據權利要求1所述的核酸檢測試紙，其中，結合墊與檢測墊重合2mm，吸水墊與檢測墊重合2mm。

7.一種核酸檢測試紙的制備方法，其包括以下步驟：

第一步驟，制備空白試紙條，結合墊、檢測墊、吸水墊依次布置在所述支撐墊上，結合墊與檢測墊部分重合，吸水墊與檢測墊部分重合，然后將其裁剪成空白試紙條；

第二步驟，制備顯色顆粒膠體溶液，將顯色顆粒膠體溶液與檢測探針溶液混合反應形成檢測探針-顯色顆粒復合物，探針-顯色顆粒復合物加載到所述空白試紙條的結合墊上；

第三步驟，對照探針溶液加載在空白試紙條的檢測墊上形成對照區，

第四步驟，捕獲探針溶液加載在空白試紙條的檢測墊上形成檢測區，

第五步驟，在檢測墊上位于結合墊和檢測區之間的位置加載鹽溶液，加熱蒸發以在其孔隙中析出鹽結晶形成可溶鹽柱，其中，所述鹽溶液包括SSC緩沖液、氯化鈉溶液、檸檬酸鈉溶液、醋酸鈉溶液、PBS緩沖液和/或碳酸鹽緩沖液。

8.根據權利要求7所述的核酸檢測試紙的制備方法，其中，所述檢測探針溶液由檢測探針粉末、醋酸緩沖液、TCEP和超純水組成，對照探針溶液由對照探針粉末、鏈霉親和素溶液、PBS緩沖液和無水乙醇組成，捕獲探針溶液由捕獲探針粉末、鏈霉親和素溶液、PBS緩沖液和無水乙醇組成。

9.根據權利要求7所述的核酸檢測試紙的制備方法，其中，第五步驟，在硝酸纖維素膜上位于結合墊和檢測區之間的位置滴加鹽溶液，鹽溶液滲透硝酸纖維素膜并填充到纖維孔隙中，形成充滿鹽溶液的柱形區域，其在37℃烘干箱烘干1～3h，鹽溶液中的水分蒸發且在硝酸纖維素膜上形成固態的可溶鹽柱。

10.一種利用權利要求1-6中任一項所述核酸檢測試紙的檢測方法，其包括以下步驟：

第一步驟，目標物粉末加入SSC緩沖液以形成目標物溶液；

第二步驟，所述結合墊浸入目標物溶液預定時間，目標物溶液依次通過結合墊、可溶鹽柱、檢測區，最后被吸水墊吸收；

第三步驟，取出核酸檢測試紙，觀察對照區和檢測區的顯色情況，若對照區和檢測區同時顯色，表明結果為陽性；若檢測區未顯色，對照區顯色，表明結果為陰性；若檢測區和對照區均未顯色，表明結果不可靠，需重復檢測。