[發明專利]一種生產羥基酪醇的方法在審
| 申請號: | 201811234787.2 | 申請日: | 2018-10-23 |
| 公開(公告)號: | CN109295113A | 公開(公告)日: | 2019-02-01 |
| 發明(設計)人: | 蔡宇杰;劉金彬;李朝智;丁彥蕊;白亞軍;鄭曉暉 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12P7/22 | 分類號: | C12P7/22;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人: | 張勇 |
| 地址: | 214000 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 基因工程菌 羥基酪醇 重組菌 生物工程技術領域 谷氨酸 大腸桿菌基因組 氨基酸轉氨酶 醇脫氫酶基因 重組大腸桿菌 脫羧酶基因 產物合成 生產效率 生物合成 基因 產業化 酶基因 底物 構建 敲除 酮酸 轉運 應用 分解 生產 轉化 | ||
1.一種生產羥基酪醇的方法,其特征在于,所述方法是利用一種大腸桿菌重組菌以L-多巴為底物生產羥基酪醇;所述大腸桿菌重組菌同時表達4種酶,分別為L-α-氨基酸轉氨酶、L-谷氨酸脫氫酶、α-酮酸脫羧酶、醇脫氫酶,并在宿主大腸桿菌的基礎上敲除了酚類化合物分解相關的基因。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述生產羥基酪醇化合物,是進行全細胞轉化生產。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述全細胞轉化生產的體系中,包括新鮮細胞濕重為1-200g/L,左旋多巴1-200g/L,L-谷氨酸1-200g/L。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,所述全細胞轉化生產的體系中,pH 6.0-9.0。
5.根據權利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述全細胞轉化生產的體系的溫度為15-40℃。
6.根據權利要求3-5任一所述的方法,其特征在于,所述全細胞轉化生產的體系的反應時間為1-48小時。
7.根據權利要求1-6任一所述的方法,其特征在于,所述大腸桿菌重組菌強化表達了谷氨酸轉運基因、NAD合成基因、磷酸吡哆醛合成基因一種或者多種組合。
8.根據權利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,所述酚類化合物分解相關的基因為hpaD、mhpB中的任意一種或者兩種組合。
9.根據權利要求1-8任一所述的方法,其特征在于,所述大腸桿菌重組菌采用pRSFDuet-1和pETDuet-1雙質粒共表達編碼這4個酶的基因;pRSFDuet-1裝載L-α-氨基酸轉氨酶和L-谷氨酸脫氫酶,pETDuet-1裝載α-酮酸脫羧酶和醇脫氫酶。
10.根據權利要求1-9任一所述的方法,其特征在于,所述大腸桿菌重組菌是將pRSFDuet-1和pETDuet-1質粒轉化到宿主Escherichia coli B21感受態細胞中得到的。
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