[發明專利]養精種玉方劑的指紋圖譜構建方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201811229630.0
• 申請日: 2018-10-22
• 公開（公告）號: CN109507310B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發明（設計）人: 姚娜;陳桂生;康志英;李雪銀;汪靜;黃燕明;曾錦麗
• 申請（專利權）人: 廣州市香雪制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 曾銀鳳

1.一種養精種玉方劑的指紋圖譜的構建方法，其特征在于，該構建方法包括如下步驟：

供試品溶液制備：將養精種玉湯劑制備成凍干粉，將所述凍干粉溶于有機溶劑，過濾，得供試品溶液；

對照品溶液制備：將阿魏酸、芍藥苷、莫諾苷、馬錢苷對照品溶于有機溶劑，得對照品溶液；

指紋圖譜的構建：吸取所述的供試品溶液、對照品溶液，注入高效液相色譜儀測定，得到具有共有特征峰的養精種玉方劑指紋圖譜；

所述測定采用的色譜條件包括：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

流動相：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.08％～0.12％的磷酸水溶液為流動相B；

梯度洗脫方式：0min～25min，流動相A的體積百分數由5％變化至15％，流動相B的體積百分數由95％變化至85％；流動相由25min～40min，流動相A的體積百分數由15％變化至20％，流動相B的體積百分數由85％變化至80％；40min～60min，流動相A的體積百分數由20％變化至50％，流動相B的體積百分數由80％變化至50％。

2.根據權利要求1所述的養精種玉方劑的指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述養精種玉方劑包括顆粒劑、浸膏、湯劑。

3.根據權利要求2所述的養精種玉方劑的指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述的流動相的流速為0.8mL/min～1.2mL/min；所述的色譜柱的柱溫為25℃～35℃；所述測定采用的檢測波長為210nm～250nm。

4.根據權利要求1至3任一項所述的養精種玉方劑的指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述的有機溶劑為體積濃度為70％～100％的甲醇溶液。

5.根據權利要求1至3任一項所述的養精種玉方劑的指紋圖譜的構建方法，其特征在于，每25mL～50mL所述的有機溶劑中加入所述凍干粉0.5g～1g。

6.根據權利要求1至3任一項所述的養精種玉方劑的指紋圖譜的構建方法，其特征在于，每1mL所述的對照溶液中含阿魏酸0.6μg～24μg、芍藥苷2.1μg～84.2μg、莫諾苷2.0μg～80.6μg、馬錢苷2.5μg～101.3μg。

7.一種養精種玉方劑的測定方法，其特征在于，該測定方法包括如下步驟：

供試品溶液制備：將待測養精種玉方劑溶于有機溶劑，過濾，得供試品溶液；

對照品溶液制備：將阿魏酸、芍藥苷、莫諾苷、馬錢苷對照品溶于有機溶劑，得對照品溶液；

供試品溶液測定：吸取所述的供試品溶液、對照品溶液，注入高效液相色譜儀進行測定，得到待測養精種玉方劑的圖譜；比較所述待測養精種玉方劑的圖譜與權利要求1構建的指紋圖譜中各峰的相對保留時間和/或各峰的峰面積，完成對待測養精種玉方劑的定性和/或定量測定；

所述測定采用的色譜條件包括：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

流動相：以乙腈為流動相A，以體積濃度為0.08％～0.12％的磷酸水溶液為流動相B；

梯度洗脫方式：0min～25min，流動相A的體積百分數由5％變化至15％，流動相B的體積百分數由95％變化至85％；流動相由25min～40min，流動相A的體積百分數由15％變化至20％，流動相B的體積百分數由85％變化至80％；40min～60min，流動相A的體積百分數由20％變化至50％，流動相B的體積百分數由80％變化至50％。

8.根據權利要求7所述的養精種玉方劑的測定方法，其特征在于，所述養精種玉方劑包括顆粒劑、浸膏、湯劑。

9.根據權利要求8所述的養精種玉方劑的測定方法，其特征在于，所述的流動相的流速為0.8mL/min～1.2mL/min；所述的色譜柱的柱溫為25℃～35℃；所述測定采用的檢測波長為210nm～250nm。

10.根據權利要求7至9任一項所述的養精種玉方劑的測定方法，其特征在于，所述的有機溶劑為體積濃度為70％～100％的甲醇溶液。