[發(fā)明專利]利用競(jìng)爭(zhēng)法快速檢測(cè)禽流感、人流感易感人群的試紙條及試紙卡

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811211047.7
• 申請(qǐng)日: 2018-10-17
• 公開（公告）號(hào): CN109100518A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖志強(qiáng);高湘;蘇建英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西醫(yī)藥控股醫(yī)藥研究院有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 范巍

本發(fā)明公開了一種利用競(jìng)爭(zhēng)法快速檢測(cè)禽流感、人流感易感人群的試紙條及試紙卡。該試紙條(卡)包括用于檢測(cè)禽流感易感人群的Ⅰ型試紙條(卡)和/或用于檢測(cè)人流感易感人群的Ⅱ型試紙條(卡)，試紙條(卡)包括沿層析方向依次設(shè)置的樣品墊、膠體金標(biāo)記墊、檢測(cè)反應(yīng)區(qū)以及吸水墊。本發(fā)明所述的試紙條(卡)檢測(cè)靈敏度高，假陽性和假陰性率低，使用方便，容易觀察區(qū)別，適合于臨床快速診斷和基層流行病學(xué)調(diào)查等中大規(guī)模應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生化檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于膠體金免疫層析技術(shù)快速檢測(cè)禽流感和人流感病毒易感人群的試紙條(卡)。

背景技術(shù)

流感病毒在自然界中的宿主分布非常廣泛，具有復(fù)雜的基因結(jié)構(gòu)，且其基因發(fā)生重配和突變的概率很高，因此在全球范圍內(nèi)呈周期性流行。流感具有發(fā)病率及病死率高、傳播速度快、波及范圍廣等特點(diǎn)，一旦爆發(fā)起來，將會(huì)對(duì)人類造成嚴(yán)重的災(zāi)難。流感病毒表面有一種重要的結(jié)構(gòu)蛋白，呈H聚體的形式存在，稱為血凝素(HA)，流感病毒侵入人體的方式主要是通過其表面的血凝素(HA)結(jié)構(gòu)與宿主細(xì)胞表面特異性糖鏈?zhǔn)荏w結(jié)合進(jìn)而感染宿主，HA主要識(shí)別的唾液酸分子會(huì)通過其末端的C原子與α2-3和Gal相結(jié)合形成SAα2-3Gal的結(jié)構(gòu)或是形成SAα2-6Gal的結(jié)構(gòu)，具有這樣的宿主細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)與HA的結(jié)合具有特異性。不同類型的流感病毒結(jié)合宿主細(xì)胞表面糖鏈末端結(jié)構(gòu)類型不同，其中，人流感病毒特異性識(shí)別的唾液酸糖鏈末端結(jié)構(gòu)為SAα2-6Gal；禽流感病毒主要識(shí)別SAα2-3Gal唾液酸糖鏈末端結(jié)構(gòu)。由于人體唾液中具有可封閉病毒表面的糖鏈末端結(jié)構(gòu)，因此它的含量多少可以用來判斷對(duì)于流感病毒的易感性。

凝集素是一類能夠與糖蛋白或糖脂表面的糖鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生結(jié)合的非酶蛋白，但它并沒有類似于抗體的免疫活性。西洋接骨木凝集素(Sambucus Nigra Lectin，SNA)和馬鞍樹凝集素-II(Maackia Aimrensis Lectin-II，MAL-II)與流感病毒HA特異性識(shí)別的區(qū)域具有相似性；其中，SNA特異性識(shí)別末端為SAα2-6Gal的糖鏈?zhǔn)荏w結(jié)構(gòu)，這與人流感病毒特異性結(jié)合的位點(diǎn)具有相似性；MAL-II特異性識(shí)別末端為SAα2-3Gal的糖鏈?zhǔn)荏w結(jié)構(gòu)，這與禽流感病毒特異性結(jié)合的位點(diǎn)具有相似性。中國(guó)專利“一種用于篩查禽流感和人流感病毒易感人群的檢測(cè)工具”(公開號(hào)：CN103884834A)披露了凝集素MAL-II與禽流感易感性以及凝集素SNA與人流感病毒易感性的相關(guān)關(guān)系，并指出，易感人群唾液中與對(duì)應(yīng)凝集素MAL-II或SNA結(jié)合的α2-3或α2-6連接末端唾液酸糖鏈結(jié)構(gòu)的表達(dá)水平顯著下調(diào)，但是該專利僅應(yīng)用于芯片試劑盒，檢測(cè)的簡(jiǎn)便性、速度和成本均有待改進(jìn)。

中國(guó)專利“快速檢測(cè)禽流感和人流感易感人群的方法以及試紙條”(公開號(hào)：CN106771120A)披露了基于膠體金層析技術(shù)快速檢測(cè)禽流感和人流感病毒易感人群的試紙條，其反應(yīng)原理為雙凝集素夾心法。但由于凝集素不具有類似于抗體的免疫活性，凝集素與唾液酸糖蛋白在結(jié)合的特異性上，無法與抗原抗體結(jié)合反應(yīng)相提并論。對(duì)于檢測(cè)唾液酸糖蛋白這類具有抗原性質(zhì)的物質(zhì)，采用競(jìng)爭(zhēng)法更為合理，既體現(xiàn)了凝集素特異性結(jié)合的專屬性，又使檢測(cè)原理更加清晰，影響檢測(cè)結(jié)果的因素也會(huì)變得更少，從而降低檢測(cè)結(jié)果的假陽性和假陰性。但檢測(cè)樣品的處理、金標(biāo)墊上的凝集素濃度、檢測(cè)線上的包被物及其濃度篩選具有了更大的難度，需要通過技術(shù)攻關(guān)才能確定，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。目前尚未見到使用競(jìng)爭(zhēng)法原理檢測(cè)禽流感和人流感易感人群的膠體金試紙條(卡)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種利用競(jìng)爭(zhēng)法快速檢測(cè)禽流感、人流感易感人群的試紙條及試紙卡。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：