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[發明專利]一種與肝細胞增殖相關circ_2072的篩選、檢測以及其應用在審

專利信息
申請號: 201811209052.4 申請日: 2018-10-17
公開(公告)號: CN109371117A 公開(公告)日: 2019-02-22
發明(設計)人: 郭建林;閆培碩;王改平;郭學強;靳偉;白格;李莉菲;徐存拴 申請(專利權)人: 河南師范大學
主分類號: C12Q1/6883 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/113;A61K31/7105;A61P1/16
代理公司: 北京易正達專利代理有限公司 11518 代理人: 陳桂蘭
地址: 453007 *** 國省代碼: 河南;41
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摘要:
搜索關鍵詞: 肝細胞增殖 篩選 應用 提取總RNA 再生模型 測序法 大鼠肝 肝再生 總RNA 檢測 構建 制備 分析 治療
【權利要求書】:

1.一種與肝再生相關circRNA的篩選方法,其特征在于:所述circRNA為circ_2072,其序列如SEQ ID NO.1所示,該circRNA的篩選方法為:構建大鼠肝再生模型,從肝再生模型中提取總RNA,然后通過篩選得到如SEQ ID NO.1所示的circ-RNA。

2.根據權利要求1所述的篩選方法,其特征在于:所述篩選為篩選出再生肝中與細胞增殖相關circRNA,篩選滿足以下4個條件的circRNA,(1)根據差異表達基因分析結果中的差異倍數值和p值,篩選出p<0.05和差異倍數在2倍以上的circRNA;(2)優先選擇發揮miRNA海綿作用的外顯子類circRNA;(3)circRNA表達的豐度,以可代表circRNA表達量的FPKM值為依據,篩選出FPKM值大于1的circRNA;(4)circRNA序列中的miRNA結合位點數目分布情況,結合位點數目為1-3個。

3.一種根據權利要求1或2所述的circ_2072的檢測方法,其特征在于:所述檢測方法為采用實時熒光定量PCR檢測,實時熒光定量PCR中的引物包括circ_2072上游引物和circ_2072下游引物,所述circ_2072上游引物和circ_2072下游引物分別為SEQ ID NO.2和SEQID NO.3。

4.根據權利要求3所述的檢測方法,其特征在于:所述實時熒光定量PCR中還包括內參上游引物和內參下游引物,所述內參上游引物和內參下游引物分別如SEQ ID NO.4和SEQID NO.5所示。

5.一種能夠調節肝細胞增殖的作用靶點,其特征在于:所述靶點為所述的circ_2072,該circ_2072的堿基序列如SEQ ID NO.1所示,通過過表達或增加circ_2072能夠促進肝細胞的增殖。

6.一種促進肝細胞增殖的方法,其特征在于:所述方法為通過加入或過表達所述的circ_2072能夠促進肝細胞的增殖。

7.一種circ_2072在促進肝細胞增殖中的應用,其特征在于:通過加入或過表達所述的circ_2072能夠促進肝細胞的增殖。

8.一種circ_2072在制備治療促進肝細胞增殖藥物中的應用,其特征在于:通過加入或過表達所述的circ_2072能夠促進肝細胞的增殖,從而實現circ_2072作為藥物來促進肝細胞增殖的目的。

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