[發明專利]利用改性利普刀實時質譜檢測三角帆蚌脂質的方法

有效

• 申請號: 201811186201.X
• 申請日: 2018-10-12
• 公開（公告）號: CN109580760B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 沈清
• 申請（專利權）人: 浙江工商大學
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62;G01N1/28;G01N1/34
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

本發明公開了一種利用改性利普刀實時質譜檢測三角帆蚌脂質的方法，包括以下步驟：將利普刀電極表面鈦基修飾，從而獲得改性利普刀；將三角帆蚌組織預處理，得三角帆蚌塊B1；使用改性利普刀電切三角帆蚌塊B1，三角帆蚌塊B1中的脂質分子經過電離后霧化成的霧化氣為氣溶膠C1，氣溶膠C1與氮氣混合形成混合氣C2一起被吸入質譜儀；輔助溶劑是質量濃度為1.2％的亮氨酸腦啡肽的丙二醇溶液，以負電離模式收集數據，獲得三角帆蚌質譜圖；將三角帆蚌質譜圖經MassLynx軟件進行對齊和降噪處理，收集質譜峰，根據其質荷比信息與脂質組學數據庫比對后確定樣品的脂質分子。本發明可實現實時質譜檢測、適用于三角帆蚌的脂質檢測。

技術領域

本發明涉及三角帆蚌中脂質的檢測方法，特別是一種利用改性利普刀實時質譜檢測三角帆蚌脂質的方法。

背景技術

三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)俗稱河蚌、珍珠蚌、三角蚌，淡水雙殼類軟體動物，屬雙殼綱、蚌科、帆蚌屬。其殼大而扁平，殼面黑色或棕褐色，厚而堅硬，長近20厘米，后背緣向上伸出一帆狀后翼，使蚌形呈三角狀。三角帆蚌是我國特有的物種，有重要的經濟價值，在淡水育珠蚌中所產珍珠的珍珠層厚、光澤強、質量極佳。三角帆蚌的肉質粗韌，土腥味重難以食用，往往被作為廢棄物丟棄或用于飼料加工，經濟附加值低。然后其含有豐富的蛋白質、脂質、維生素和無機礦物元素等，具有較好的加工利用空間。

脂質是生物最基本的物質基礎，也是最重要的營養元素之一。隨著對脂質研究的深入，越來越多的人們意識到脂質在生命活動中的重要作用，如信號傳導，細胞間作用，在抑制糖尿病、動脈粥樣硬化、阿爾茨海默病等疾病，更是扮演著不可或缺的角色。脂質是維持細胞結構的重要組成部分，也是新陳代謝不可或缺的營養元素，其具備廣泛的生物學功能，諸如活化細胞，維持代謝與荷爾蒙分泌均衡，增強人體免疫力等。實驗證明，磷脂可以分解血脂、膽固醇，阻止多余脂肪在血管壁沉積，改善受損的胰島β細胞及周圍的組織結構。

近幾年來質譜技術的應用越來越廣泛，研究人員對質譜高通量快速檢測技術也提出了更高的要求。然而生物組織樣本無法直接用于高靈敏度的質譜檢測，通常需要專業人員經組織勻漿、化合物提取、分離純化等復雜繁瑣的樣品前處理步驟后，方能用于質譜分析，故無法實現組織樣本的實時質譜檢測研究，亦無法滿足高通量檢測技術研究的需求。

因此，現有的脂質檢測方法，存在樣品前處理繁瑣、無法實現實時質譜檢測、不適用于食品的脂質檢測的問題；目前利用改性利普刀實時質譜檢測三角帆蚌脂質的方法尚未見報道。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種利用改性利普刀實時質譜檢測三角帆蚌脂質的方法。本發明僅需簡單樣品前處理、可實現實時質譜檢測、適用于三角帆蚌的脂質檢測。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種利用改性利普刀實時質譜檢測三角帆蚌脂質的方法，包括以下步驟：

A、利普刀電極表面鈦基修飾：

將利普刀頭洗滌后，表面干燥；

制備溶膠液A1：所述溶膠液A1為500±50μL聚二甲基硅氧烷、500±50μL甲基三甲氧基硅烷、50±5μL聚甲基聚硅氧烷、500±50μL三氟乙酸的混合液；

將表面干燥后的利普刀頭浸沒于溶膠液A1(浸沒時間為5±2min)，使其表面形成溶膠薄膜；

取納米二氧化鈦顆粒均勻覆蓋于利普刀頭表面，并于60±5℃干燥20～28小時(優選24小時)，得到改性利普刀；

B、三角帆蚌組織預處理：

將三角帆蚌洗凈去殼、去除囊腺，所得的肌肉組織清洗后切割成塊，得三角帆蚌塊B1；

C、改性利普刀實時質譜檢測：