[發明專利]一種提高纈氨酸產量的方法

在審

• 申請號: 201811153962.5
• 申請日: 2018-09-30
• 公開（公告）號: CN109207533A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 徐慶陽;徐達;陳寧;李燕軍;謝希賢;馬倩;范曉光;張成林
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12P13/08
• 分類號: C12P13/08
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

本發明提供一種利用蛋氨酸和氯化膽堿復配的方式提高纈氨酸發酵產量的方法，包括以下步驟：在纈氨酸的發酵培養時，葡萄糖初始添加加量為80g/L。當培養基中葡萄糖耗至10g/L左右時，開始流加含有1g/L氯化膽堿(相對于初始發酵液體積而言)的80％葡萄糖溶液，使培養基中殘糖濃度保持在10?15g/L；發酵過程中溫度為32℃，通過流加25％氨水維持pH在7.0?7.2，通過調節轉速和通風將溶氧控制在20％左右。本發明將氯化膽堿與蛋氨酸以一定量配比之后加入到發酵培養基底物中，再將氯化膽堿添加到葡萄糖溶液中，使其隨糖流加至發酵液中，以提高菌體生產纈氨酸的能力，發酵48h—52h，纈氨酸產量從80—85g/L提高到95—100g/L。

技術領域

本發明屬于微生物及發酵工程技術領域，具體涉及一種提高纈氨酸產量的方法。

背景技術

L-纈氨酸是人和動物機體所必需的八種氨基酸之一，與亮氨酸、異亮氨酸同屬于三種支鏈氨基酸，在生理上具有多種調節功能，在人類生命代謝中具有重要的地位，其除用于一般營養型膳食配制以外，還大量用于生產各類復合氨基酸制劑，在醫療方面具有極為廣泛的應用。L-纈氨酸是藥用氨基酸原料中用量最大的品種之一。目前來看，L-纈氨酸主要利用谷氨酸棒狀桿菌進行微生物發酵生產，此生產方式具有成本低、條件溫和以及可大規模生產等優點，是非常經濟的一種生產方法。因此，利用微生物發酵法生產纈氨酸具有重要意義。

采用微生物發酵法生產纈氨酸時，所使用的菌株為谷氨酸棒桿菌誘變株，該菌株生長緩慢，發酵周期長，產酸速率較慢，因此，提高菌體生長速度，縮短發酵生產周期，加快產酸速率是亟待解決的問題。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種提高纈氨酸產量的方法。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：

一種提高纈氨酸產量的方法，通過流加氯化膽堿提高纈氨酸產量，具體步驟如下：

(1)在發酵的常規培養基底物中加入0.5—1.5g/L的蛋氨酸添加物，經過48h—52h發酵培養，驗證最終產酸變化；

(2)在發酵的常規培養基底物中加入0.5—1.5g/L的氯化膽堿添加物，經過48h—52h發酵培養，驗證最終產酸變化；

(3)在發酵的常規培養基底物中加入0.5—1.5g/L的蛋氨酸添加物與0.5—1.5g/L的氯化膽堿添加物進行配比，經過48h—52h發酵培養，驗證最終產酸變化；

(4)在常規發酵過程中，隨糖流加濃度為0.5—1.5g/L的氯化膽堿，經過48h—52h的發酵培養，驗證最終產酸變化；

(5)在發酵的常規培養基底物中加入0.5—1.5g/L的蛋氨酸添加物與0.5—1.5g/L的氯化膽堿添加物進行配比，且同時隨糖流加濃度為0.5—1.5g/L的氯化膽堿，經過48h—52h的發酵培養，驗證最終產酸變化。

優選的，上述提高纈氨酸產量的方法，所述步驟(1)中在發酵的常規培養基底物中加入1g/L的蛋氨酸添加物進行發酵，最終產酸提升了3—5g/L。

優選的，上述提高纈氨酸產量的方法，所述步驟(2)中在發酵的常規培養基底物中加入1g/L的氯化膽堿添加物進行發酵，最終產酸提升了7—8g/L。

優選的，上述提高纈氨酸產量的方法，所述步驟(3)中在發酵的常規培養基底物中加入1g/L的蛋氨酸添加物與1g/L的氯化膽堿添加物進行發酵，最終產酸提升了9—10g/L。

優選的，上述提高纈氨酸產量的方法，所述步驟(4)中在常規發酵過程中，隨糖流加濃度為1g/L的氯化膽堿進行發酵，最終產酸提升了3—5g/L。