[發明專利]利用向日葵、蓖麻接種枯草芽孢桿菌修復Cu、Pb、As污染土壤的方法

有效

• 申請號: 201811050902.0
• 申請日: 2018-09-10
• 公開（公告）號: CN109127693B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 夏小凱;孫燕;王江帆;張燕
• 申請（專利權）人: 江西夏氏春秋環境股份有限公司
• 主分類號: B09C1/00
• 分類號: B09C1/00;B09C1/02;B09C1/10
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.利用向日葵、蓖麻接種枯草芽孢桿菌修復Cu、Pb、As污染土壤的方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）菌懸液制備：將枯草芽孢桿菌轉接到LB液體培養基中，在（29±1）℃下搖床培養24h后，在冷凍離心機上8000r/min離心10min，棄上清液，用滅菌的磷酸鹽緩沖液沖洗菌體兩次，最后將菌體溶解在無菌水中，即為備用的菌懸液；

（2）種子接菌：選取飽滿的蓖麻和向日葵種子，先用1%的NaClO浸泡20min表面消毒，再用無菌水沖洗后將其置于濃度為10⁹CFU/mL菌懸液中包衣30min；

（3）土壤預處理：對待修復的土壤翻整，澆水，施肥；

（4）栽培：待上述包衣的蓖麻種子和向日葵種子陰干后，播種在污染土壤中，兩種植物實行混種，株距0.5~1.0m；

（5）管理：當苗高10cm時進行間苗，拔除生長過密的細弱幼苗，并結合中耕除草一次，在苗高17~20cm時即可定苗，并進行第二次中耕除草，在開花前進行第三次中耕除草，當苗高30cm時，結合中耕進行培土壅蔸，固定根部；

（6）移除及后續處理：一段時間后移除所有蓖麻與向日葵，對移除的植株進行無公害處理，提取其中的Cu、Pb、As元素；

其中，所述步驟（1）中LB液體培養基的組成為：胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、NaCl 5g/L，用NaOH調整pH為7；

所述步驟（4）中蓖麻種子和向日葵種子先在溫度為25℃、相對濕度為65%的沙土中萌發，待幼苗出土長出3~4片真葉時，帶泥移栽到污染土壤中，移栽后每隔3~5天澆水一次，到成活為止；

所述步驟（2）菌懸液中添加有新高脂膜、磷酸二氫鉀、尿素混合溶液。

2.如權利要求1所述利用向日葵、蓖麻接種枯草芽孢桿菌修復Cu、Pb、As污染土壤的方法，其特征在于，所述步驟（5）管理過程中蓖麻定期施加氮肥，開花后改施磷肥。

3.如權利要求1所述利用向日葵、蓖麻接種枯草芽孢桿菌修復Cu、Pb、As污染土壤的方法，其特征在于，所述步驟（6）還包括在移除前兩周在土壤里施加螯合劑。

4.如權利要求1所述利用向日葵、蓖麻接種枯草芽孢桿菌修復Cu、Pb、As污染土壤的方法，其特征在于，當出現Cu濃度超過800mg/kg，Pb濃度超過1600mg/kg，As濃度超過400mg/kg情況之一時，在所述修復Cu、Pb、As污染土壤的方法前對污染土壤進行淋洗預處理。