[發明專利]一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201811039827.8
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109225177B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 曹立民;鄭洪偉;林洪;隋建新;王博成;殷佳珞
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: B01J20/285
• 分類號: B01J20/285;B01D15/38;B01J20/30
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏;何俊

1.一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于：

所述聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料為用于細菌分離的親和柱填料；

所述制備方法包括以下步驟：

1) 瓊脂糖微球的制備；

2）環氧化瓊脂糖的制備：以1g瓊脂糖微球計，將1g瓊脂糖微球與NaOH溶液8-12mL，NaBH₄溶液8-12mL以及環氧氯丙烷6-10mL混合并置于恒溫振蕩器中震蕩活化，隨后用水沖洗至中性，以沖洗后的水中加入硫代硫酸鈉以及酚酞不顯色為止，得到環氧化瓊脂糖；

3）環氧化瓊脂糖的氨基化修飾：以5g環氧化瓊脂糖計，將5g環氧化瓊脂糖與15 mL體積濃度為5-15%的聚乙烯亞胺的乙腈溶液充分混合，55-65℃攪拌反應10-15h，得到氨基化瓊脂糖；

4）苯硼酸瓊脂糖的制備：以0.2 g氨基化瓊脂糖計，將0.2g氨基化瓊脂糖加入到15-25mL重蒸甲醇中，超聲后依次加入2.6-2.7mmol的3,5-二氟-4-甲酰基苯硼酸和5.3-5.4mmol的氰基硼酸鈉，常溫攪拌反應70-75h，產物用無水甲醇，NaHCO₃溶液，氯化鈉溶液和水多次沖洗，真空干燥。

2.如權利要求1所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟1）中，瓊脂糖微球的制備方法如下：以0.5g瓊脂糖干粉計，將0.5g瓊脂糖干粉溶于10-20mL水中，攪拌煮沸為透明凝膠狀，混勻作為水相；將3-5g Span80 加入到100mL液體石蠟中，75-85℃恒溫混勻后作為油相；在攪拌下將水相滴加到油相中，隨后持續攪拌后冷卻至室溫，再持續攪拌使微球成形；制得的微球用石油醚和異丙醇的混合洗滌液洗滌，再分別用石油醚和水清洗，得到瓊脂糖微球。

3.如權利要求2所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟1）中，水相滴加到油相過程中攪拌速率為800-900rpm，隨后以200-300rpm持續攪拌8-12min后冷卻至室溫，再持續攪拌2-8min 使微球成形。

4.如權利要求2所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟1）中，所述混合洗滌液中石油醚和異丙醇的體積比為8-12:1。

5.如權利要求1所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟2）中，所述NaOH 溶液的濃度為0.8-1.0mol/L，所述NaBH₄溶液的濃度為0.4-0.6 g/L；震蕩活化溫度為35-45℃，時間為3-5h。

6.如權利要求1所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟3）中，所述聚乙烯亞胺的乙腈溶液中聚乙烯亞胺與乙腈的質量比為1:8-12。

7.如權利要求1或6所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟3）中，所述聚乙烯亞胺的分子量Mw=600-70000。

8.如權利要求1所述的一種聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料的制備方法，其特征在于，步驟4）中，超聲時間為1-5min，所述NaHCO₃溶液的濃度為3-7wt%，所述氯化鈉溶液的濃度為3-7wt%，真空干燥溫度為55-65℃。

9.一種如權利要求1所述方法制備的聚乙烯亞胺超支化瓊脂糖基硼親和材料在細菌分離中應用。