[發明專利]一種嬰兒奶瓶中危險化學品離散型生物傳感檢測方法

在審

• 申請號: 201811033788.0
• 申請日: 2018-09-05
• 公開（公告）號: CN109085146A
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發明（設計）人: 丁利;許宙;康震;清江;王季誠;李明安
• 申請（專利權）人: 寧波海歌電器有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 天津創智天誠知識產權代理事務所(普通合伙) 12214
• 代理人: 陳昌娟;田陽

本發明公開了一種嬰兒奶瓶中危險化學品離散型生物傳感檢測方法，本發明通過共價鍵結合作用，將BPA適配體(DNA1)和它的互補鏈(DNA2)分別修飾在AuNPs、UCNPs材料的表面，制備功能化修飾的AuNPs、UCNPs探針(AuNPs?DNA1、UCNPs?DNA2)；基于熒光共振能量轉移原理構建的金納米淬滅UCNPs熒光的危險化學品檢測方法，實現了該生物傳感器對危險化學品的高靈敏性檢測，穩定性高、可重復性強、靈敏度高。

技術領域

本發明屬于檢測技術領域，涉及一種嬰兒奶瓶中危險化學品離散型生物傳感器檢測方法。

背景技術

奶瓶現在是家庭常用的哺乳工具，但是也會帶來健康問題，危險化學品就是潛藏在嬰兒奶瓶中的隱形殺手。嬰兒奶瓶中危險化學的種類繁多，如樹脂及穩定劑、增塑劑、著色劑等添加劑等。近年來出現的雙酚A事件引起了人們對嬰兒奶瓶中危害化學品的廣泛關注，雙酚A是制造環氧樹脂、聚碳酸樹脂、聚苯乙烯樹脂的主要原料，又是用于酚醛樹脂、聚氯乙烯、抗氧化劑等的穩定劑。在哺乳過程中，很有可能引起雙酚A從奶瓶中遷移出來，而直接進入體內，對嬰兒發育、免疫力造成影響，甚至致癌。因此，嬰兒奶瓶中的危害化學品越來越引起了國內外的普遍重視。

傳統檢測危險化學品的方法主要有液相色譜、氣相色譜、氣液質聯用儀等。這些方法雖然具有靈敏度高、使用范圍廣等優點，但價格昂貴、處理復雜、實驗過程繁瑣費時，所用大量的有機試劑易污染環境，不能進行在線檢測。目前，免疫分析技術是危險化學品快速檢測中應用最普遍的技術。然而，現有免疫檢測技術所用試劑盒和傳感器往往具有專一性；免疫標記物也存在不穩定、容易失活等缺點，限制了相關免疫分析技術的進一步發展。離散型生物傳感技術具有高靈敏度、操作簡單、響應快、無須標記與耗樣量少等優點。但與熒光分析法相比，仍然存在傳感芯片檢測專一性和成本高問題。因此，如何實現低成本、快速準確檢測嬰兒奶瓶中不同危險化學品已成為食品安全快速檢測領域熱點研究問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種嬰兒奶瓶中危險化學品離散型生物傳感檢測方法，在于解決現有危險化學品快速檢測技術存在的特異性差、穩定性差、耗材量大、造價昂貴等問題，同時極大提高危險化學品的檢測限，該方法具有通用、高穩定性、高靈敏度、操作簡單等優點，滿足對奶瓶中各種危險化學品的檢測要求。

本發明的技術方案為：一種嬰兒奶瓶中危險化學品離散型生物傳感檢測方法，利用離散型生物傳感檢測儀檢測熒光強度，間接測量嬰兒奶瓶中危險化學品的含量；按照下列步驟進行：

步驟一、取待檢測危險化學品適配體溶液，即DNA1儲備液，加入金納米材料(AuNPs)溶液中，室溫下孵育得到A液；

步驟二、待檢測危險化學品適配體DNA1的互補鏈DNA2儲備液，加入到上轉換熒光納米材料(UCNPs)溶液中，室溫下孵育得到B液；

步驟三、向步驟一中的A液中加入待測樣品，形成C液；

步驟四、向步驟三中的C液中加入B液，反應1-2h后，進行熒光檢測。

在上述技術方案中，在步驟一中，所述待檢測危險化學品為雙酚A，DNA1序列為5′-NH2-ATAGCGTCTCAGGACGACGGGTTCACAGTCCGTTGTC-3′。

在上述技術方案中，在步驟一中，所述金納米材料按照下列步驟進行制備：

取97.5mL超純水以及2.5mLHAuCl₄溶液混合，升溫至沸騰；7～8min后，加2mL質量濃度為1％的檸檬酸三鈉溶液，溶液由無色變為酒紅色后，繼續加熱10min，然后停止加熱，所得酒紅色液體即為13nm AuNPs。

在上述技術方案中，在步驟二中，所述上轉換熒光納米材料按照下列步驟進行制備：