[發(fā)明專利]同時檢測含膠類藥材制品中多種動物源性成分的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811031300.0
• 申請日: 2018-09-05
• 公開（公告）號: CN108828108A
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發(fā)明（設計）人: 陳鴻玉;孫輝;殷帥;丁野;潘小紅;楊青;高潔瑩;龍凌云;童達;黃曉燕;李文莉;舒畢瓊;李玲
• 申請（專利權）人: 湖南省藥品檢驗研究院(湖南藥用輔料檢驗檢測中心)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 馬強;蔣尊龍

1.一種同時檢測含膠類藥材制品中多種動物源性成分的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備對照混合溶液：取阿膠、黃明膠和龜甲膠3種對照藥材混合，用碳酸氫銨溶液提取、定容，將提取后的提取液用胰蛋白酶進行酶水解，得到對照混合溶液；

(2)制備供試品溶液：將含膠類藥材制品作為供試樣品，用碳酸氫銨溶液提取、定容，將提取后的提取液用胰蛋白酶進行酶水解，得到供試品溶液；其中制備供試品溶液的方法與制備對照混合溶液的方法相同；

(3)用超高效液相色譜-二級串聯(lián)質譜法分別對對照混合溶液和供試品溶液進行測試，對膠類藥材制品中驢源性成分、龜源性成分及摻入的牛源性成分同時進行定性和定量分析；其中，根據特征離子峰的位置進行定性分析，根據特征離子峰的面積進行定量分析；阿膠、龜甲膠、黃明膠在一級質譜中的特征母離子峰的位置分別為m/z：539.8、641.3、631.3，在二級質譜中對應的特征子離子峰的位置分別為m/z：923.8、546.4、726.2。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中取每種對照藥材各0.1g，加入質量分數1％的碳酸氫銨溶液進行提取，再加入質量分數1％的碳酸氫銨定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液100μl，加入胰蛋白酶溶液15μl，搖勻，置于37℃下進行酶水解20小時以上制得對照混合溶液；其中胰蛋白酶溶液為胰蛋白酶和碳酸氫銨的水溶液，胰蛋白酶的濃度為2μg/μl，碳酸氫銨的質量分數為1％。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，提取為加熱回流提取或超聲提取。

4.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，酶水解時間為20-40h。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，含膠類藥材制品為補血益母丸、驢膠補血顆粒、復方阿膠補血顆粒、婦科止帶片和/或阿膠塊中的一種或幾種。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，色譜條件為：Hypersil GOLD C18色譜柱；流速：0.3mL·min^-1；柱溫：30℃；進樣量：5μl；流動相A為0.1％甲酸溶液，流動相B為乙腈，梯度洗脫程序：0～6min，95％A→93％A，5％B→7％B；6～8min，93％A→10％A，7％B→90％B；8～9min，10％A，90％B；9～9.5min，10％A→95％A，95％B→5％B；9.5～12min，95％A，5％B。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，質譜條件為：電噴霧離子源，正離子化模式ESI⁺，多反應監(jiān)測掃描方式，噴霧電壓為3.1kv，鞘氣為20Arb，輔助氣為8Arb，離子傳熱管溫度為350℃，蒸發(fā)溫度為350℃。