[發明專利]生產谷氨酰胺轉氨酶的干酪乳桿菌誘變菌及其用途

有效

• 申請號: 201811024020.7
• 申請日: 2018-09-04
• 公開（公告）號: CN109266572B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 張胤;李肯;趙聃
• 申請（專利權）人: 湖南肯基因科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N15/01;C12N9/10;A23L29/269;A23L2/52;A23C9/154;A23L11/45;A23L11/50;A23L11/65;C12R1/245
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• 代理人: 暫無信息

1.一種高產谷氨酰胺轉氨酶的干酪乳桿菌誘變菌株（Lactobacillus casei strain）KJY14，保藏號為CGMCC No. 15424，保藏日期為2018年03月07日，保藏單位是中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

2.通過權利要求1所述的誘變菌株，用于生產谷氨酰胺轉氨酶的方法，包括：

（1）將保藏的干酪乳桿菌誘變菌株于豆清液培養液中活化培養；

（2）將活化的培養液，以10⁸CFU/ml的濃度加入預先制備好的豆漿、豆清液或米漿培養液中，于37℃下靜置培養5-50h，獲得終發酵液；

（3）離心過濾菌液，獲得無細菌的上清液；

（4）SDS-PAGE電泳初步驗證結果，然后經過硫酸銨沉淀和透析后，并通過SePhadex過柱進行純化。

3.通過權利要求1所述的干酪乳桿菌，與下列多種其他誘變菌株進行復配，以生產谷氨酰胺轉氨酶的方法，步驟包括：

（1）將保藏的干酪乳桿菌和多種其他誘變菌株分別進行活化培養，其中，活化培養基選自MRS液體培養基，其他誘變菌株選自鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、玉米乳桿菌（Lactobacillus zeae strain）、腸膜狀明串珠菌（Leuconostocmesenteroidesstrain）和植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)；

（2）將活化的誘變菌株培養液，加入預先制備的豆清液或豆漿培養液中，于37℃下靜置培養5-50h，獲得終發酵液，其中干酪乳桿菌的加入量為10⁸CFU/ml的濃度，另外4種菌種的加入量為10⁷CFU/ml的濃度；

（3）離心過濾菌液，獲得無細菌的上清液；

（4）SDS-PAGE電泳初步驗證結果，然后經過硫酸銨沉淀和透析后，并通過SePhadex過柱進行純化，

其中所述鼠李糖乳桿菌選自鼠李糖乳桿菌KJY11，保藏號為CGMCC No. 15421，保藏日期為2018年03月07日；

所述植物乳桿菌誘變菌株KJY12，保藏號為CGMCCNo. 15422，保藏日期為2018年03月07日；

所述玉米乳桿菌選自玉米乳桿菌KJY13，保藏號為CGMCC No. 15423，保藏日期為2018年03月07日；

所述干酪乳桿菌選自干酪乳桿菌KJY14，保藏號為CGMCC No. 15424，保藏日期為2018年03月07日；

所述腸膜狀明串珠菌選自腸膜狀明串珠菌KJY15，保藏號為CGMCC No. 15425，保藏日期為2018年03月07日。