[發明專利]冬蟲夏草菌絲快速培養方法

在審

• 申請號: 201811002927.3
• 申請日: 2018-08-30
• 公開（公告）號: CN109055239A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 鐘興林
• 申請（專利權）人: 重慶農笑農業發展有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 北京和信華成知識產權代理事務所(普通合伙) 11390
• 代理人: 胡劍輝

本發明公開了一種冬蟲夏草菌絲快速培養方法，包括以下步驟：Ⅰ.清洗；Ⅱ.分離提純；Ⅲ.培養復壯。本發明通過選擇適宜的培養基，添加了植物激素和中藥提取物，有利于誘導冬蟲夏草的芽孢和菌絲的生長，從而縮短人工培育冬蟲夏草周期，具有重要的經濟意義；通過設定特定的溫控值和光照時間，提高了蟲草素等活性物質的含量，同時由于離原草產地距離最近，培養環境與原草的生長壞境最保證了蟲草的最大活性成分，分離培養得到的冬蟲夏草菌絲體的各種功效更加接近野生蟲草。

技術領域

本發明涉及應用生物技術原理人工培育真菌的技術領域，具體涉及一種冬蟲夏草菌絲快速培養方法。

背景技術

冬蟲夏草(Ophiocordyceps sinensis)是我國一種傳統的名貴中藥材，是一種昆蟲真菌的結合體。蟲是蟲草蝙蝠蛾的幼蟲，菌是冬蟲夏草真菌。冬蟲夏草的形成是由夏天冬蟲夏草真菌感染蝠蛾幼蟲，菌絲吸取幼蟲體內的營養并逐漸充滿蟲體，直至第二年春夏從蟲體頭部長出形成子實體。由于近年人工采挖活動的增多，野生冬蟲夏草數量驟減，產地植被遭受到了巨大的破壞。冬蟲夏草長3-5cm，粗約3-8mm，因為其形狀像一棵野草，所以起名為“冬蟲夏草”。冬蟲夏草一般生長在海拔3500-5000m的氣候寒冷、土壤濕潤且富含有機質的分水嶺兩側的草地或高山草甸頂部以及平緩的山坡上。其菌種是嗜冷真菌的一種，溫度對其子座的形成非常重要。產地的地表平均溫度為4.4-9℃。菌絲生長繁殖的最適溫度為12-18℃，生長溫度為5-32℃；形成菌核的溫度為10-20℃；形成子座的溫度為14-25℃；子座長出土面的溫度為26-32℃；子囊孢子釋放的溫度在28-32℃之間。冬蟲夏草菌種侵染活的蝙蝠蛾科幼蟲后使得鉆入土中的蝙蝠蛾科幼蟲死亡，菌絲在活的和死的蟲體內生長繁殖故為兼性腐生菌。幼蟲染菌鉆入土中需要的相對濕度50％-60％；菌絲體生長最適土壤的濕度為40％-60％，相對濕度為80％-95％；蟲草菌菌絲體在蟲體中生長需要的相對濕度為60％-70％。

現今人工冬蟲夏草已經可以成功培育，但產量不高。其中一個制約因素是：在蝠蛾幼蟲感染冬蟲夏草真菌后，真菌在蝠蛾幼蟲體內以芽生孢子(芽孢)形式存在，并以芽孢萌發產生新的芽孢的方式進行繁殖。所謂的芽孢，是指冬蟲夏草在侵染寄主幼蟲后，在幼蟲體內形成大量類似孢子的長梭形細胞。自然情況下，芽孢萌發成菌絲的過程會歷經很長時間，一般需要10天左右。而幼蟲體內芽孢發育成菌絲是幼蟲產生子實體原基(產生并分化為子實體的菌絲結構)的必經環節，因此，縮短這一環節的時間至關重要。另外，雖然十多年來國內許多單位已經對冬蟲夏草菌的生長特征、發酵培養基優化和發酵工藝進行大量研究工作，但冬蟲夏草菌絲體活性成分還較低，特別是冬蟲夏草菌絲體中蟲草素含量更低，因此有必要提高冬蟲夏草菌的蟲草素含量。現有提高蟲草素的技術方案一般是對發酵培養基進行改良，或在發酵過程，把一些化學物質，如油酸或其前體物類似物或植物生長調節劑等加入到發酵培養基中，由于發酵培養基體積大，所需原材料或添加物的重量大，成本高。很少見到通過對冬蟲夏草菌種子培養基的研究，來提高蟲草素含量的研究。因此，冬蟲夏草真菌的培養和發酵工藝技術研究的創新，對提高培養冬蟲夏草菌菌絲體的活性成分含量，改善冬蟲夏草菌的產品質量和藥用效果有積極意義。

發明內容

針對上述現有技術中存在的不足，本發明提供了一種冬蟲夏草菌絲快速培養方法。

一種冬蟲夏草菌絲快速培養方法，包括以下步驟：

Ⅰ.清洗；

Ⅱ.分離提純；

Ⅲ.培養復壯。

具體地，所述冬蟲夏草菌絲快速培養方法，包括以下步驟：

Ⅰ.清洗：將新鮮那曲蟲草去除外部菌套，刷去冬蟲夏草表面雜質，先用消毒液進行消毒，再用滅菌水進行清洗，在無菌條件下，將所得僵蟲體切塊，得到蟲體塊；