[發(fā)明專利]一種離子互補型自組裝肽及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811001044.0
• 申請日: 2018-08-30
• 公開（公告）號: CN108659103A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葛飛;晉珍珍;陶玉貴;孫良玉;張旭光;朱龍寶
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽工程大學(xué)
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/04;A61K9/107;A61K47/62;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 深圳市百瑞專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 44240
• 代理人: 葉綠林;楊大慶

1.一種離子互補型自組裝肽，該離子互補型自組裝肽的氨基酸序列為DGRPSFCFKFEP，分子結(jié)構(gòu)式如下：

2.如權(quán)利要求1所述離子互補型自組裝肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)將基體樹脂浸泡于DCM或DMF中，浸泡溫度為20-25℃，浸泡時間為2-5min；接著加入N,N-二異丙基乙胺、天冬氨酸D進(jìn)行接觸反應(yīng)，反應(yīng)溫度為20-25℃，反應(yīng)時間為40-80min；然后洗滌、采用二氯甲烷、甲醇和N,N-二異丙基乙胺加入反應(yīng)體系中進(jìn)行封頭處理、脫保護(hù)，最后洗滌直至茚三酮檢測為藍(lán)色以得到二級樹脂；

2)將所述二級樹脂依次獨立的與甘氨酸G、精氨酸R、脯氨酸P、絲氨酸S、苯丙氨酸F、半胱氨酸C、苯丙氨酸F、賴氨酸K、苯丙氨酸F、谷氨酸E、脯氨酸P在1-羥基苯并三氮唑、N,N-二異丙基碳二亞胺的存在下進(jìn)行接觸反應(yīng)進(jìn)行單次改性處理，反應(yīng)溫度為20-25℃，反應(yīng)時間為50-80min；脫保護(hù)、洗滌直至茚三酮檢測為藍(lán)色以得到三級樹脂；

3)將所述三級樹脂洗滌、干燥，然后與切割液進(jìn)行切割反應(yīng)以制得離子互補型自組裝肽DGRPSFCFKFEP；所述切割液由重量比為95～97:5～3的三氟乙酸和水組成；切割溫度為20-25℃，切割時間為100-140min；干燥溫度為20-25℃，干燥時間為120-150min。

3.如權(quán)利要求2所述離子互補型自組裝肽的制備方法，其特征在于：所述基體樹脂為2-氯三苯甲基氯樹脂、Wang樹脂、MBHA樹脂和rink樹脂中的一種。

4.如權(quán)利要求1所述離子互補型自組裝肽作為藥物載體在對阿霉素包載上的應(yīng)用方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟A：以二甲基甲酰胺為溶劑，三乙胺和鹽酸阿霉素以1:10在磁力攪拌器中混合攪拌，避光反應(yīng)，反應(yīng)溫度為20-30℃，反應(yīng)時間為4-6h；之后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中加入適量的水，共沸蒸餾有機溶劑，經(jīng)冷凍干燥，得疏水性阿霉素；

步驟B：將所述疏水性阿霉素溶于水，加入離子互補型自組裝多肽DGRPSFCFKFEP，所述離子互補型自組裝多肽DGRPSFCFKFEP的純度為90-95％；且滴加少量甲酸，所述甲酸的濃度為88-98mg/mL；混合均勻后進(jìn)行接觸反應(yīng)，反應(yīng)溫度為15-35℃，反應(yīng)時間為24-36h；然后進(jìn)行透析，最后離心處理去上清液以得到離子互補型自組裝肽的水溶液，即得離子互補型自組裝肽作為藥物載體實現(xiàn)對阿霉素的包載。

5.如權(quán)利要求4所述離子互補型自組裝肽作為藥物載體在對阿霉素包載上的應(yīng)用方法，其特征在于：所述步驟A中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中加入適量的水，共沸蒸餾有機溶劑，具體為：將反應(yīng)體系和水以1:1-3混合，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中反應(yīng)30-60min。