[發(fā)明專利]一種地不容組培繁殖方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810997524.0
• 申請日: 2018-08-29
• 公開（公告）號: CN109122318A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧國賓;張媛;趙露琴;向建英;楊燕;曾祥飛;曾瓊
• 申請（專利權(quán)）人: 西南林業(yè)大學(xué);云南澈川生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海諾衣知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31298
• 代理人: 衣然

本發(fā)明公開了一種地不容組培繁殖方法，包括(1)外植體選擇、(2)外植體消毒、(3)叢生芽誘導(dǎo)、(4)增殖培養(yǎng)、(5)生根培養(yǎng)等步驟。本發(fā)明成功建立了地不容的組培快繁體系，顯著提高了地不容叢生芽誘導(dǎo)率、增殖系數(shù)、生根率。具有組培效率高，成本低的優(yōu)勢，解決了野生地不容野生資源過度開發(fā)、藥材供應(yīng)少和種植規(guī)模受種苗數(shù)量和質(zhì)量限制等問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥材組培領(lǐng)域，尤其涉及一種地不容組培繁殖方法。

背景技術(shù)

地不容(Stephania epigaea H.S.Lo)為防己科千金藤屬草質(zhì)藤本屬植物，以塊根入藥，有祛風(fēng)除濕，清熱解毒，止痛的功效，主要用于胃痛，風(fēng)濕痹痛，咽喉不利，癰腫瘡毒。其內(nèi)含羅通定具解熱鎮(zhèn)痛作用，臨床上主要用于治療胃潰瘍、十二指腸潰瘍的疼痛以及月經(jīng)痛、分娩后宮縮痛、緊張性失眠以及痙攣性咳嗽等；其內(nèi)含青藤堿具鎮(zhèn)痛抗炎作用，主要用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和神經(jīng)痛。同時，地不容由于其塊根性狀多異奇特，莖葉亮綠可藝術(shù)性人工纏繞，還常做一種價值較高的觀賞性盆景。

地不容主要分布于云南除東北部、西南部和西雙版納尚未發(fā)現(xiàn)分布外，幾乎各地都有，四川南部和西部亦有分布，常生于石山。近年來，隨著藥用價值的開發(fā)以及觀賞性價值的推廣，地不容需求突飛猛增，而有限的野生資源不能滿足市場需求，其價格亦隨之迅猛上漲，不少科研機(jī)構(gòu)、企業(yè)紛紛開展地不容的種植技術(shù)研究，但由于地不容雌雄異株，且雌株在種群中分布量少，使得種子量較少，同時由于種子發(fā)芽率低、發(fā)芽周期長。同時也因其為雌雄異株，種子繁殖雜交性強(qiáng)，作為觀賞性植物其變異性大，母本遺傳性狀不穩(wěn)定。近年來，部分單位開展了廣西地不容、小葉地不容等的組培技術(shù)研究，但是在增殖率、生根情況方面效果都不甚理想。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，發(fā)明了一種操作簡便、培養(yǎng)周期短、增殖率高的地不容組培快繁技術(shù)，能有效降低生產(chǎn)成本，可為規(guī)模化種植短期內(nèi)快速提供優(yōu)質(zhì)種苗的繁育方法。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種地不容組培繁殖方法，其特征在于，包含以下步驟：(1)外植體選擇、(2)外植體消毒、(3)叢生芽誘導(dǎo)、(4)增殖培養(yǎng)、(5)生根培養(yǎng)；

優(yōu)選地，步驟(1)所述的外植體選擇包含以下步驟：待新莖葉發(fā)出后，選取頂端10-20cm幼嫩帶芽莖段；

優(yōu)選地，步驟(2)所述的外植體消毒包含以下步驟：將選取的外植體剪成帶芽小段后用飽和肥皂水溶液涮洗后沖淋，用75％酒精消毒10-25s，再用飽和漂白粉溶液消毒20-30min，最后用0.05％升汞溶液消毒10-15min；

優(yōu)選地，步驟(3)所述的叢生芽誘導(dǎo)包含以下步驟：將消毒好的外植體，去掉兩端，切至0.5-1.0cm帶芽莖段，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在人工控制的環(huán)境下培養(yǎng)；更加優(yōu)選地，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+NAA 0-0.05mg/L+TIBA 1.0-3.0mg/L+KT 2.0-4.0mg/L+活性炭0.2-0.5g/L；所述的在人工控制的環(huán)境下培養(yǎng)包含以下步驟：培養(yǎng)溫度為24-30℃，光照強(qiáng)度1000-2000lux，前15天在單日光照時間6h的條件下培養(yǎng)，15天后在單日光照時間12h的條件下培養(yǎng)；

優(yōu)選地，步驟(4)所述的增殖培養(yǎng)包含以下步驟：將叢生芽接種在增殖培養(yǎng)基上，在人工控制的環(huán)境下培養(yǎng)；更加優(yōu)選地，所述的增殖培養(yǎng)基為：MS+IBA 0-0.1mg/L+TIBA2.0-4.0mg/L+KT2.0-4.0mg/L+硝酸銀1.0-5.0μg/L+活性炭0.2-0.5g/L；所述的在人工控制的環(huán)境下培養(yǎng)包含以下步驟：培養(yǎng)溫度為24-30℃，光照強(qiáng)度為1000-2000lux，單日光照時間為12h；