[發(fā)明專利]一種人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸液

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810983592.1
• 申請日: 2018-08-27
• 公開（公告）號: CN109042627B
• 公開（公告）日: 2021-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧珊珊;鄭桂純
• 申請（專利權(quán)）人: 南京賽爾健生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及一種人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸液。本發(fā)明在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上添加5μM太子參環(huán)肽A可以有效克服現(xiàn)有技術(shù)運(yùn)輸液懸浮72h后細(xì)胞活率降低較為明顯的不足，本發(fā)明運(yùn)輸液配方為：按質(zhì)量百分比計(jì)由30％的0.2％海藻糖溶液(海藻糖的PBS溶液)、25％的紅細(xì)胞儲(chǔ)存液、5％的0.2％肝素鈣溶液(肝素鈣的PBS溶液)和40％的人血白蛋白注射液常溫混合均勻組成，并含有5μM太子參環(huán)肽A。該運(yùn)輸液不僅可以提高人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸72h時(shí)的活率，且不影響其多向分化能力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及干細(xì)胞領(lǐng)域，尤其涉及一種人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸液。

背景技術(shù)

干細(xì)胞是一類具有自我更新和多向分化能力的細(xì)胞。正是因?yàn)樗脑偕鷿摿涂伤苄允沟盟鼜V泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)和干細(xì)胞研究中。干細(xì)胞為目前缺乏有效治療方法的許多疾病帶來希望，包括腦卒中、亨廷頓舞蹈癥、阿爾茨海默病和帕金森病。

間充質(zhì)干細(xì)胞是從成年和胎兒組織分離的多能基質(zhì)細(xì)胞，被定義為黏附的成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞具有內(nèi)在的歸巢能力，可以遷移到損傷組織，積極參與組織修復(fù)。間充質(zhì)干細(xì)胞雖然具有多能性，但自我更新能力逐漸降低導(dǎo)致細(xì)胞分裂停滯，在體外表現(xiàn)出有限的使用壽命，限制了它在治療上的應(yīng)用。與成年組織相比，圍產(chǎn)期組織來源間充質(zhì)干細(xì)胞具有較低的突變風(fēng)險(xiǎn)，并且表現(xiàn)出優(yōu)異的細(xì)胞活性，包括更大的分化、歸巢和植入效力，以及較低的免疫原性。不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞具有相似甚至相同的表型，但由于其獨(dú)特的遺傳特征、遷移能力、分離方法，不同圍產(chǎn)期組織來源間充質(zhì)干細(xì)胞具有不同的治療效果。

目前常用的細(xì)胞運(yùn)輸方式有兩種，一種是非培養(yǎng)狀態(tài)低溫液氮運(yùn)輸，另一種是培養(yǎng)狀態(tài)下裝滿培養(yǎng)基運(yùn)輸。兩種方法都有一定的弊端。其中利用液氮運(yùn)輸可以在特定的液氮容器內(nèi)存放大量的細(xì)胞后進(jìn)行運(yùn)輸，但是存在一定的安全隱患，且造價(jià)高，凍存液成分不明確，一般含有不同比例的血清，會(huì)對后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成一定的影響，同時(shí)凍存過的細(xì)胞活性會(huì)下降。而對貼壁細(xì)胞進(jìn)行運(yùn)輸，單次運(yùn)輸細(xì)胞數(shù)量較低，細(xì)胞培養(yǎng)基耗費(fèi)過多，且液體含量較高時(shí)不能采用空運(yùn)模式，同時(shí)如果密封不嚴(yán)或者在運(yùn)輸過程中存在一系列碰撞則容易致使培養(yǎng)基外漏，細(xì)胞無培養(yǎng)基會(huì)出現(xiàn)死亡。

中國專利CN108432742A公開了一種間充質(zhì)干細(xì)胞常溫運(yùn)輸液，該申請克服了傳統(tǒng)間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸?shù)谋锥耍瑢?shí)現(xiàn)了常溫、大量運(yùn)輸，避免了傳統(tǒng)運(yùn)輸方式中培養(yǎng)基、液氮的大量浪費(fèi)，有效降低成本；且該申請運(yùn)輸液的成分簡單、配制方便、無污染，對間充質(zhì)干細(xì)胞具有優(yōu)異的生物學(xué)特性保存效果。但是，3種細(xì)胞(人羊水、臍帶、胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞)在細(xì)胞運(yùn)輸液中常溫放置72h后的活細(xì)胞數(shù)量均出現(xiàn)顯著降低，不適合于長途運(yùn)輸。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是對現(xiàn)有技術(shù)的改進(jìn)，旨在提供一種適合長途運(yùn)輸?shù)娜搜蛩g充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸液。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案：

一種干細(xì)胞常溫運(yùn)輸液，按質(zhì)量百分比計(jì)由30％的0.2％海藻糖溶液、25％的紅細(xì)胞儲(chǔ)存液、5％的0.2％肝素鈣溶液和40％的人血白蛋白注射液常溫混合均勻組成，還含有太子參環(huán)肽A。

優(yōu)選地，0.2％海藻糖溶液由海藻糖和PBS緩沖液配制而成，0.2％為質(zhì)量體積百分含量。

優(yōu)選地，0.2％肝素鈣溶液由肝素鈣和PBS緩沖液配制而成，0.2％為質(zhì)量體積百分含量。

優(yōu)選地，太子參環(huán)肽A濃度為5μM。

上述干細(xì)胞常溫運(yùn)輸液在人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸中的應(yīng)用。

本發(fā)明在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上添加5μM太子參環(huán)肽A可以有效克服現(xiàn)有技術(shù)運(yùn)輸液懸浮72h后細(xì)胞活率降低較為明顯的不足，本發(fā)明運(yùn)輸液配方為：按質(zhì)量百分比計(jì)由30％的0.2％海藻糖溶液(海藻糖的PBS溶液)、25％的紅細(xì)胞儲(chǔ)存液、5％的0.2％肝素鈣溶液(肝素鈣的PBS溶液)和40％的人血白蛋白注射液常溫混合均勻組成，并含有5μM太子參環(huán)肽A。該運(yùn)輸液不僅可以提高人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞運(yùn)輸72h時(shí)的活率，且不影響其多向分化能力。