[發(fā)明專利]蓖麻毒素B的制備及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810957682.3
• 申請(qǐng)日: 2018-08-22
• 公開（公告）號(hào): CN110404052B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉文森;許娜;侯峰;曹利利;宮鵬濤;李思明;陳星遠(yuǎn);丁鶴;王典
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 侯峰
• 主分類號(hào): A61K38/16
• 分類號(hào): A61K38/16;A61P3/10
• 代理公司: 天津市尚文知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12222
• 代理人: 張東浩

本發(fā)明公開了一種蓖麻毒素B的制備及其應(yīng)用，涉及抗糖尿病藥物的技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種用于治療2型糖尿病的重組蛋白藥物，其能降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂，可以開發(fā)成治療2型糖尿病的藥物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗糖尿病蛋白藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種用于對(duì)2型糖尿病的重組蓖麻毒素B鏈蛋白突變體。

背景技術(shù)

糖尿病是一種因胰島素分泌不足和或胰島素抵抗而引起的糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂的免疫系統(tǒng)疾病，涉及全身各個(gè)系統(tǒng)，甚至可誘發(fā)許多致命性并發(fā)癥，嚴(yán)重危害人類健康，糖尿病已經(jīng)成為當(dāng)前危害人類健康的第三大疾病。90％以上的糖尿病患者為2型糖尿病(type 2diabetes mellitus，T2DM)。目前，全世界約有2.46億人患有T2DM，預(yù)計(jì)在20年內(nèi)T2DM患者數(shù)目將增至3.8億。中國(guó)是全球糖尿病患者人數(shù)最多的國(guó)家，但中國(guó)T2DM患者的血糖達(dá)標(biāo)率嚴(yán)重不足。現(xiàn)階段治療T2DM的藥物主要為傳統(tǒng)抗糖尿病藥物，包括：磺酰脲類、格列奈類、雙胍類、噻唑烷二酮、α-葡萄糖苷酶抑制劑及胰島素等，但這些藥物均存在不同程度的不良反應(yīng)，如引發(fā)低血糖、胃腸道不適、肥胖等。因而開發(fā)更優(yōu)良的糖尿病治療新藥顯得尤為必要，隨著對(duì)糖尿病基礎(chǔ)理論研究的不斷深入，抗糖尿病新藥的開發(fā)成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。許多制藥公司正在開發(fā)新的抗糖尿病藥物，以滿足目前的糖尿病治療需求。

由于糖尿病復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制，使得醫(yī)學(xué)工作者在藥物研發(fā)的過(guò)程中，逐漸發(fā)現(xiàn)了許多潛在的抗糖尿病療法的新型目標(biāo)。與此同時(shí)，據(jù)統(tǒng)計(jì)，2013至今進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)或遞交NDA/BLA或獲得批準(zhǔn)用于治療糖尿病的藥物有65種，分為非胰島素類抗糖尿病藥(41種，包括用于治療糖尿病相關(guān)疾病的藥物10種，占63.1％)、胰島素類藥(8種，12.3％)和復(fù)方制劑(16種，24.6％)。這些數(shù)據(jù)表明，國(guó)際制藥公司將開發(fā)糖尿病新藥的重點(diǎn)集中在非胰島素類抗糖尿病藥物上，本發(fā)明重組蓖麻毒素B鏈蛋白在一定程度上契合國(guó)際藥物開發(fā)的需求，應(yīng)用前景廣闊。

蓖麻毒素(Ricin)是一種由A鏈(RTA)和B鏈(RTB)兩條鏈通過(guò)二硫鍵連接的異源二聚體糖蛋白。其中，RTA是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)可抑制蛋白質(zhì)合成的核糖體滅活蛋白。RTB是一個(gè)兩葉形結(jié)構(gòu)的分子，由兩個(gè)相同折疊的拓?fù)鋵W(xué)球狀結(jié)構(gòu)域構(gòu)成，每一個(gè)區(qū)域又包括三個(gè)亞區(qū)(ɑ，β，γ)，只有1ɑ和2β有明顯的半乳糖結(jié)合活性，無(wú)毒，具有凝集素活性，可協(xié)助A鏈進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮生物學(xué)功能。RTB可以結(jié)合不同的糖結(jié)構(gòu)，調(diào)節(jié)各種生物過(guò)程，包括細(xì)胞與宿主、病原體相互作用和先天免疫反應(yīng)。

目前，通過(guò)國(guó)內(nèi)外公開出版物的檢索并未發(fā)現(xiàn)重組蓖麻毒素B鏈蛋白突變體治療2型糖尿病以及并發(fā)癥的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決目前治療2型糖尿病藥物效果不理想，副作用較多的問題，本發(fā)明提供一種重組蓖麻毒素B鏈蛋白突變體及其表達(dá)方法，并驗(yàn)證其對(duì)2型糖尿病大鼠的降糖效果。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

包含SEQ ID：1序列的蛋白在制備治療2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。

包含SEQ ID：1序列的蛋白的插入、刪除、替換等突變體在制備治療2型糖尿病藥物中的應(yīng)用。

所述SEQ ID：1蛋白序列的編碼核苷酸為SEQ ID：2。

SEQ ID：1序列的蛋白可降低2型糖尿病模型的大鼠空腹血糖水平。

SEQ ID：1序列的蛋白可降低2型糖尿病模型的大鼠糖化血紅蛋白水平。

SEQ ID：1序列的蛋白可降低2型糖尿病模型的大鼠的飲水量。

SEQ ID：1序列的蛋白可增加2型糖尿病模型的大鼠的體重，改善消瘦癥狀。

SEQ ID：1序列的蛋白可改善2型糖尿病模型的大鼠的甘油三酯(TG)和總膽固醇(TCH)水平。