[發(fā)明專利]人子宮內(nèi)膜組織來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810930181.6
• 申請(qǐng)日: 2018-08-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108998411A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 解軍;李仁科;范雪梅;宋慧芳;何生;平毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775;A61K35/28;A61P9/10;A61P25/28;A61P17/00
• 代理公司: 太原華弈知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 14108
• 代理人: 李毅

本發(fā)明涉及一種人子宮內(nèi)膜組織來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞，該子宮內(nèi)膜組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞是從人的子宮內(nèi)膜組織中分離得到。通過(guò)酶解法消化人體子宮內(nèi)膜組織獲得單細(xì)胞懸液后，直接接種于間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)及傳代純化，或者采用密度梯度離心法分離得到包含有間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞群，接種于間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基中，進(jìn)行培養(yǎng)及傳代純化，最終獲得了新的具有強(qiáng)增殖能力及遷移分化能力的間充質(zhì)干細(xì)胞。本發(fā)明的間充質(zhì)干細(xì)胞可以作為制備預(yù)防或治療缺血性疾病、神經(jīng)損傷、神經(jīng)退行性疾病、其他年齡相關(guān)退行性疾病的藥物得到應(yīng)用，也可以用于制備包括醫(yī)學(xué)美容、亞健康人群保健、老年個(gè)體年輕化等方面的產(chǎn)品。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種新的干細(xì)胞，特別是一種從人體子宮內(nèi)膜組織中提取的間充質(zhì)干細(xì)胞。本發(fā)明還涉及該子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

干細(xì)胞是一種具有自我復(fù)制、更新和多向分化潛能的細(xì)胞，具有修復(fù)受損組織細(xì)胞的潛能，近年來(lái)已成為疾病治療和組織工程領(lǐng)域理想的種子細(xì)胞，是各種疾病尤其是各種難治性疾病可能的新的有效治療方法。

根據(jù)發(fā)育階段不同，干細(xì)胞又分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞，其中成體干細(xì)胞因其來(lái)源廣泛，致瘤性相對(duì)較低等特點(diǎn)，具有廣泛的應(yīng)用前景。

成體干細(xì)胞中的間充質(zhì)干細(xì)胞更因其易分離培養(yǎng)，擴(kuò)增純化，免疫原性低等特點(diǎn)，成為干細(xì)胞移植及組織工程領(lǐng)域理想的種子細(xì)胞。不僅為包括心梗、腦梗等在內(nèi)的缺血性疾病、神經(jīng)損傷、神經(jīng)退行性疾病、其他年齡相關(guān)的退行性疾病及其他各種不同疾病的治療提供了新的希望，同時(shí)在醫(yī)學(xué)美容領(lǐng)域，亞健康人群自我保健，乃至老年個(gè)體年輕化等方面都提供了新的思路。

研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞具有促進(jìn)損傷修復(fù)、改善多種疾病預(yù)后的功能。增殖活力旺盛的年輕間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行移植，能夠促使受體對(duì)修復(fù)干細(xì)胞的反應(yīng)性增強(qiáng)，促進(jìn)受體的年輕化。間充質(zhì)干細(xì)胞發(fā)揮其修復(fù)治療功能需要具備兩個(gè)要素，一是數(shù)量充足，一是包括自我更新增殖等能力在內(nèi)的功能旺盛活躍。

目前已有的間充質(zhì)干細(xì)胞主要包括骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞等，研究結(jié)果顯示它們具有較好的促進(jìn)損傷修復(fù)及疾病預(yù)防、治療前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種新的具有強(qiáng)修復(fù)再生能力的人子宮內(nèi)膜組織來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞。

提供所述人子宮內(nèi)膜組織來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法，是本發(fā)明的另一發(fā)明目的。

本發(fā)明的目的還在于提供所述新的間充質(zhì)干細(xì)胞的應(yīng)用。

一種有趣的臨床現(xiàn)象給發(fā)明人提供了新的重要提示：絕經(jīng)前女性的心血管事件發(fā)生率明顯低于同年齡段的男性，但女性這種發(fā)病率低的優(yōu)勢(shì)會(huì)在絕經(jīng)后喪失。

現(xiàn)有研究結(jié)果顯示，雖然絕經(jīng)前后女性激素水平發(fā)生巨大變化，但單純補(bǔ)充激素治療并不能明顯遏制絕經(jīng)后女性心血管事件發(fā)生率增加的態(tài)勢(shì)。另一方面，子宮內(nèi)膜具有超強(qiáng)的再生能力，其功能層會(huì)發(fā)生周期性增殖、分泌和脫落，即絕經(jīng)前女性所具有的生理期周期性變化。以上現(xiàn)象均提示，人體子宮中具有再生能力很強(qiáng)的干細(xì)胞。

在絕經(jīng)前女性、絕經(jīng)后女性以及男性三種人群中均具有骨髓及脂肪等其他來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞，而導(dǎo)致上述這種發(fā)病率差異的原因，很可能是三種人群中是否具有子宮中再生能力很強(qiáng)的干細(xì)胞，同時(shí)預(yù)示子宮中的這種干細(xì)胞具有很強(qiáng)的損傷修復(fù)功能。

發(fā)明人在前期的小鼠研究中已經(jīng)觀察到，小鼠心梗后，有子宮來(lái)源的細(xì)胞歸巢到心臟缺血損傷局部，參與血管新生及缺血損傷修復(fù)，并進(jìn)而改善缺血心臟的心功能。因此，在人體子宮中是否也存在具有強(qiáng)的修復(fù)再生能力的干細(xì)胞，以及如何分離、培養(yǎng)出人體子宮中這種強(qiáng)的修復(fù)再生能力的干細(xì)胞，并將其用于預(yù)防和臨床治療領(lǐng)域，是一項(xiàng)非常具有臨床應(yīng)用前景及挑戰(zhàn)性的工作。

首先，本發(fā)明提出了一種新的具有強(qiáng)修復(fù)再生能力的人子宮內(nèi)膜組織來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞，該子宮內(nèi)膜組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞能夠從人的子宮內(nèi)膜組織中分離得到。