[發明專利]一種促進干細胞增殖的試劑

在審

• 申請號: 201810914440.6
• 申請日: 2018-08-12
• 公開（公告）號: CN108949681A
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 胡艷
• 申請（專利權）人: 胡艷
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種促進干細胞增殖的試劑。本發明發現，去氫鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿具有顯著促進骨髓間充質干細胞體外增殖的作用，顯著優于鉤藤堿、毛鉤藤堿。因此，去氫鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿可以制備成促進骨髓間充質干細胞體外增殖的試劑。

技術領域

本發明屬于干細胞領域，涉及促進干細胞增殖的試劑。

背景技術

目前用于組織工程的種子細胞有骨髓間充質干細胞、牙周膜干細胞、胚胎干細胞等。骨髓間充質干細胞被證明是最理想的種子細胞，因為其容易獲得，且在大量擴增時可以維持其多向分化潛能，所以對骨髓間充質干細胞的研究開發也最為熱門。

為了在短時間內體外大量獲得骨髓間充質干細胞，研究者們一直在尋找開發可以促進骨髓間充質干細胞體外增殖的化合試劑。

發明內容

本發明的目的在于提供一種促進骨髓間充質干細胞增殖的試劑。

本發明上述目的通過如下技術方案實現：

一種促進干細胞增殖的試劑，活性成分為去氫鉤藤堿。

進一步地，所述干細胞為骨髓間充質干細胞。

去氫鉤藤堿在促進干細胞增殖方面的應用。

進一步地，所述干細胞為骨髓間充質干細胞。

一種促進干細胞增殖的試劑，活性成分為去氫毛鉤藤堿。

進一步地，所述干細胞為骨髓間充質干細胞。

去氫毛鉤藤堿在促進干細胞增殖方面的應用。

進一步地，所述干細胞為骨髓間充質干細胞。

有益效果：

本發明發現，去氫鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿具有顯著促進骨髓間充質干細胞體外增殖的作用，顯著優于鉤藤堿、毛鉤藤堿。因此，去氫鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿可以制備成促進骨髓間充質干細胞體外增殖的試劑。

附圖說明

圖1為鉤藤堿、去氫鉤藤堿、毛鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿的化學結構式；

圖2為鉤藤堿、去氫鉤藤堿、毛鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿對骨髓間充質干細胞增殖的影響。

具體實施方式

下面結合附圖和實施例具體介紹本發明實質性內容，但并不以此限定本發明的保護范圍。

一、實驗材料

鉤藤堿、去氫鉤藤堿、毛鉤藤堿、去氫毛鉤藤堿純度不低于98％，化學式如圖1所示。大鼠采用24個月齡健康雄性SD大鼠。低糖DMEM培養基(DMEM-LG)、胎牛血清(FBS)購自美國Hyclone公司；四甲基偶氮唑鹽MTT購自美國Sigma公司。

二、實驗方法

1、骨髓間充質干細胞分離培養

采用全骨髓貼壁法培養，大鼠麻醉后，75％乙醇浸泡5min，無菌條件取單側股骨、脛骨，剔除肌肉附著組織，眼科剪刀剪去兩側骺端，用1ml注射器抽取完全培養基(含10％FBS的DMEM-LG)反復沖洗骨髓腔，直至沖洗液透亮，收集細胞懸液，1000r/min室溫離心5min，用完全培養基重懸細胞，按5×10⁶ml密度接種于25cm²細胞培養瓶中，37℃、5％CO₂培養箱中靜止培養。24h后更換培養基，以后每48～72h更換培養基。當細胞逐漸鋪滿瓶底80％～90％后按照1:3進行細胞傳代。

2、MTT法檢測BMSCs增殖活性