[發明專利]一種檢測食品中亞硫酸鹽含量的試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201810913226.9
• 申請日: 2018-08-13
• 公開（公告）號: CN109187455B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 曾林濤;段沖;吳娟娟
• 申請（專利權）人: 天津理工大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/78;G01N24/08;C09K11/06;C07D215/12;C07D215/06
• 代理公司: 天津耀達律師事務所 12223
• 代理人: 張耀

一種檢測食品中亞硫酸鹽含量的試劑盒及其應用，其中試劑盒中的探針是將帶有取代基R¹的活潑甲基在催化劑作用下與喹啉醛縮合，在反應溫度為25～120℃下反應0.5～60小時，將溶液濃縮后，利用硅膠柱層析得到中間產物B；中間產物B與三氟磺酸酯在反應溫度為25～120℃下反應0.5～60小時，除去溶劑，利用硅膠柱層析得到探針A。將適當濃度一定體積的探針A加到96孔板中適當保存制成反應試劑盒。本發明的試劑盒對亞硫酸鹽具有顏色加深和近紅外熒光增強的雙重可視化響應，成本低，且具有良好的選擇性，用于食品中亞硫酸鹽的快速現場檢測，在食品中亞硫酸鹽的檢測中具有很大的應用前景。

技術領域

本發明涉及利用顏色和熒光雙重可視化信號變化效果檢測亞硫酸鈉的反應試劑盒，以及該試劑盒中主要作用試劑的合成方法以及試劑盒的制作工藝。

背景技術

亞硫酸鹽是食品工業上常用的漂白劑和防腐劑，其作為食品添加劑在食品中發揮的作用主要有以下幾個方面：(1)防止食品的酶促褐變與非酶褐變，使食品的外觀光亮、潔白；(2)抑制微生物生長從而延長食品的保質期；(3)抑制食品中氧化酶的活性，防止氧化酶引起營養成分破壞和色變；(4)與食品中含有的有色物質結合，因其還原性起到漂白作用。

然而，隨著研究的逐步深入，亞硫酸鹽的毒性日益受到關注。它的毒性主要表現在以下幾個方面：(1)亞硫酸鹽能夠與氨基酸、蛋白質等物質發生反應，還能與多種維生素結合將其裂解為其它產物，從而嚴重破壞食品中的營養物質，降低食品的營養價值(2)長期接觸低濃度的亞硫酸鹽可導致頭痛、頭昏、全身乏力，嚴重時會引起慢性咽喉炎、支氣管炎、嗅覺及味覺減退等癥狀。(3)如果是動物長期吃含有亞硫酸鹽的食物，會出現神經發炎、骨髓萎縮等不良的癥狀，這會對動物的成長帶來障礙。(4)亞硫酸鹽還會促使細胞發生變異，誘導不飽和脂肪酸的氧化等危害。因此，食品中亞硫酸鹽添加劑的含量必須經過嚴格地檢驗和控制。我國《食品添加劑使用衛生標準》(GB2760-2015)對各類食品中亞硫酸鹽的允許用量有明確規定。即食品中亞硫酸鹽使用量不得高于30mg/kg。

鑒于亞硫酸鹽的這些嚴重副作用，迫切需要發展能夠快速定量檢測亞硫酸鹽的檢測方法。傳統檢測亞硫酸鹽的方法主要有離子色譜法、電化學法和毛細管電泳法。由于這些方法需要復雜的前處理步驟、高端的儀器設備、耗時長，所以在食品檢測應用中受到一定的限制。光化學傳感器由于其具有價格低廉，方法簡單、響應迅速和信息量大等優點近幾年來迅速發展起來，受到廣泛關注。其主要原理是利用傳感器單元的光學性質(吸收或發射)改變作為輸出信號，實現對待分析物的檢測。光化學傳感器按照其信號檢測的不同，可以分為熒光化學傳感器和比色化學傳感器。熒光化學傳感器(熒光探針)主要是依靠熒光信號為檢測手段，通常有熒光的增強，淬滅或者發光波長的變化；比色化學傳感器則是借助于色調的變化，尤其是增色型比色傳感通過肉眼觀察就可檢測，實際應用方便?，F階段單一的熒光化學傳感器或比色化學傳感器，由于其選擇性好，靈敏度高，響應時間快等特點，目前在生物分子的檢測中的應用越來越廣泛。但能同時實現熒光傳感和增色型比色傳感的探針還很少，因此依照此性質制成便攜式試劑盒顯得十分必要。

通過分子的發光現象和吸收光譜的同時變化來探測分子間的相互作用的試劑盒，其優點可以概括為以下幾個方面：(1)方便快捷，具有很高的靈敏度；(2)具有顏色和熒光雙重響應，兩種信號相互佐證，增加可信度；(3)如果在吸收光譜上有比較大的變化，可以在不借助于任何儀器的情況下，直接通過顏色的變化來達到檢測的目的。

隨著我國人民生活質量的提高，食品安全問題日益引起人們的高度重視。食品安全的保障依賴于可靠的質量監控，因此迫切需要研究出一種操作簡單、檢測快速且適于現場檢測的試劑盒。試劑盒具有攜帶方便，操作簡單，檢測速度快等特點，應成為食品中亞硫酸鹽現場快速檢測的主流技術，是當前和今后一段時期內食品中亞硫酸鹽快速檢測的首選方法，為食品生產廠家的自我監控和市場監督提供有力的技術保障。

發明內容

本發明的目的之一是克服現有技術中用于檢測食品中亞硫酸鹽的工具的性能和結構上的不足，提供一種新型的性能優良的原位實時檢測工具，即亞硫酸鹽反應試劑盒。