[發(fā)明專利]基于熒光定量PCR的茶樹基因CsTTG1表達(dá)特征分析方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810896179.1
• 申請(qǐng)日: 2018-08-08
• 公開（公告）號(hào): CN108950048A
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫彬妹;代風(fēng)玲;劉任堅(jiān);劉少群;肖熙
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12Q1/6851
• 代理公司: 廣州市時(shí)代知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44438
• 代理人: 盧浩

本發(fā)明提供一種基于熒光定量PCR的茶樹基因CsTTG1表達(dá)特征分析方法，其特征在于，包含以下步驟：S1.獲取待測(cè)基因組RNA；S2.將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA；S3.以反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA為模板，以Acting基因作為內(nèi)參，通過PCR擴(kuò)增引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；S4.對(duì)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序檢測(cè)分析。本發(fā)明能夠?qū)τ诓铇浠駽sTTG1表達(dá)特征的特異性強(qiáng)，檢測(cè)準(zhǔn)確，靈敏度高，簡(jiǎn)便快速的優(yōu)點(diǎn)，具有良好的檢測(cè)能力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于熒光定量PCR的茶樹基因CsTTG1表達(dá)特征分析方法。

背景技術(shù)

茶樹嫩梢上的茸毛是茶樹的一種優(yōu)良特性。茸毛含有豐富的咖啡堿、氨基酸、茶多酚、黃酮類物質(zhì)等成分，其生化特性很大程度影響茶葉的口感品質(zhì)。隨著生活質(zhì)量的提高，人們對(duì)健康的飲茶生活越發(fā)注重，茶葉消費(fèi)已超越感官享受，抗癌、抗氧化、降壓等功能更受市場(chǎng)消費(fèi)者的喜愛。茶葉茸毛中所含的茶多酚、咖啡堿和氨基酸等主要內(nèi)含物賦予了茶葉更多保健功效及多樣性的口感，如苦味、澀味和甜味。在早春時(shí)期采摘的茶葉被認(rèn)為品質(zhì)極佳，主要因其含有較多的茸毛，茸毛越多，茶葉越嫩，成茶的品質(zhì)越好，因此茶葉中茸毛對(duì)其品質(zhì)特征的形成具有明顯的影響作用，被認(rèn)為是一種重要的性狀。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)茶樹茸毛的研究?jī)H停留在生化特性上，沒有對(duì)調(diào)控茶樹茸毛的相關(guān)基因進(jìn)行深入研究，主要集中在擬南芥、甘藍(lán)型油菜等植物中，因此探討調(diào)控茶樹茸毛形成發(fā)育的分子機(jī)理，對(duì)開展茶樹育種有著深遠(yuǎn)的意義。

現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于茶葉“紫娟”的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)茶樹中和調(diào)控?cái)M南芥表皮毛生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的同源基因AtTTG1表達(dá)模式相關(guān)，并命名為CsTTG1。通過試驗(yàn)驗(yàn)證了CsTTG1基因的表達(dá)模式與茸毛發(fā)育具有一定的關(guān)系，可基于此對(duì)不同品種間茸毛密度分布特征的研究。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供一種基于熒光定量PCR的茶樹基因CsTTG1表達(dá)特征分析方法，本發(fā)明能夠?qū)τ诓铇浠駽sTTG1表達(dá)特征的特異性強(qiáng)，檢測(cè)準(zhǔn)確，靈敏度高，簡(jiǎn)便快速的優(yōu)點(diǎn)，具有良好的檢測(cè)能力。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種基于熒光定量PCR的茶樹基因CsTTG1表達(dá)特征分析方法，其特征在于，包含以下步驟：

S1.獲取待測(cè)基因組RNA；

S2.將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA；

S3.以反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA為模板，以Acting基因作為內(nèi)參，通過PCR擴(kuò)增引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

S4.對(duì)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序檢測(cè)分析。

進(jìn)一步的，所述待測(cè)基因組為CsTTG1基因組。所述的CsTTG1基因核苷酸序列為：