[發明專利]高分子量絲素蛋白鏈段的制備方法

有效

• 申請號: 201810867500.3
• 申請日: 2018-08-02
• 公開（公告）號: CN108948171B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 盧神州;劉凱;姜福建;李明忠
• 申請（專利權）人: 南通紡織絲綢產業技術研究院;蘇州大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 蘇州謹和知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32295
• 代理人: 田媛

1.一種高分子量絲素蛋白多肽鏈段的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)脫膠：將原料蠶繭殼脫膠烘干后得到純絲素纖維；

(2)溶解：將所述步驟(1)中獲得的純絲素纖維用溴化鋰溶液溶解，得到絲素蛋白溴化鋰溶液，并將所述的絲素蛋白溴化鋰溶液冷卻至室溫；

(3)還原：將第一還原劑加入到所述步驟(2)中冷卻至室溫的絲素蛋白溴化鋰溶液中，常溫反應1-20h；

(4)透析：將所述步驟(3)中還原后的絲素蛋白溴化鋰溶液灌入一透析袋中，將裝有所述還原后的絲素蛋白溴化鋰溶液的透析袋置于第一透析液中透析36h以上，每隔2-6h更新一次第一透析液，而后再將所述的透析袋置于第二透析液中繼續透析24h以上，每隔2-6h更新一次第二透析液，第二透析液為去離子水，其中第一透析液和第二透析液的溫度均為4-8℃；

其中，所述的透析袋由截留分子量為100-300kDa的半透膜制成；

其中，所述的第一透析液采用如下方法配制而成：向去離子水中，先通氮氣去除所述去離子水中的溶解氧，然后往其中加入第二還原劑，再調節pH值至pH為7-9，制得弱堿性的第一透析液；

(5)抽取：完成所述步驟(4)的透析后，抽取所述透析袋內的溶液，即獲得所述高分子量絲素蛋白多肽鏈段的水溶液；

在所述步驟(3)中，所述的第一還原劑為巰基乙醇、乙二硫醇、丙硫醇、丙二硫醇、二硫蘇糖醇、丁硫醇、半胱氨酸、谷胱甘肽中的一種；

在所述步驟(3)中，所述絲素蛋白溴化鋰溶液中加入的所述第一還原劑的量為10-200mmol/L；

配制所述的第一透析液時，加入的所述第二還原劑為亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、連二硫酸鈉、焦亞硫酸鈉中的一種；

配制所述的第一透析液時，加入的所述第二還原劑的量為0.001-0.01mol/L。

2.根據權利要求1所述的高分子量絲素蛋白多肽鏈段的制備方法，其特征在于，配制所述的第一透析液時，先通氮氣0.5-1h以去除所述去離子水中的溶解氧。

3.根據權利要求1所述的高分子量絲素蛋白多肽鏈段的制備方法，其特征在于，配制所述的第一透析液時，通過加入碳酸氫鈉調節pH值。