[發明專利]HOXB8基因的定量檢測在結直腸癌預后判斷中的應用有效
| 申請號： | 201810858233.3 | 申請日： | 2018-07-31 |
| 公開（公告）號： | CN108753981B | 公開（公告）日： | 2022-04-15 |
| 發明（設計）人： | 舒興盛;應穎;皇曉燕;李田園 | 申請（專利權）人： | 深圳大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 深圳市君勝知識產權代理事務所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 王永文;劉文求 |
| 地址： | 518060 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | hoxb8 基因 定量 檢測 直腸癌 預后 判斷 中的 應用 | ||
1.HOXB8基因的定量檢測引物在制備結直腸癌預后判斷試劑盒中的應用；
所述定量檢測引物如下：
HOXB8-F: 5’-GTCCCTGCGCCCCAATTATTA-3’；
HOXB8-R：5’-GCCCGTGGTAGAACTCCTG-3’；
所述試劑盒的使用步驟如下：
（1）、取原位結直腸癌組織樣本，提取組織樣本的總RNA；
（2）、對組織樣本的總RNA進行逆轉錄，得到組織樣本的cDNA；
（3）、以獲得的組織樣本的cDNA為模板，采用HOXB8基因的定量檢測引物，進行熒光定量PCR檢測，得到HOXB8基因的Ct值；
以獲得的組織樣本的cDNA為模板，采用設計的GAPDH基因的引物，進行熒光定量PCR檢測，得到GAPDH基因的Ct值；
其中GAPDH基因的引物如下：
GAPDH-F：5’-GACAAGCTTCCCGTTCTCAG-3’；
GAPDH-R2：5’-GAGTCAACGGATTTGGTCGT-3’；
熒光定量PCR檢測的條件：95℃、3分鐘，1個循環；95℃、15秒，60℃、30秒，72℃、30秒，40個循環；
（4）、根據組織樣本的HOXB8基因的Ct值和GAPDH基因的Ct值，得到組織樣本的ΔCt值，根據所述組織樣本的ΔCt值確定組織樣本中HOXB8基因的表達水平情況并進行預后判斷；
當檢測到組織樣本的ΔCt值 ≥ -10.68時，判斷HOXB8基因為高表達，表明結直腸癌患者術后生存期短；反之，當檢測到組織樣本的ΔCt值 -10.68時，判斷HOXB8基因為低表達，表明結直腸癌患者術后生存期長。
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