[發明專利]一種牛蒡根固體鏈霉菌產孢培養基及培養方法

有效

• 申請號: 201810835608.4
• 申請日: 2018-07-26
• 公開（公告）號: CN109112081B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 趙志龍;張慧珍;史曉委;況鵬群;王振
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 劉萍

本發明公開了一種牛蒡根固體鏈霉菌產孢培養基及鏈霉菌培養的方法，培養基由干牛蒡根20～30g/L、甘露醇15～25g/L、瓊脂粉15～20g/L和水組成。將牛蒡根烘干粉碎后，加入水煮沸后過濾，濾液與甘露醇、瓊脂粉混合，用NaOH調節pH值至7.0～7.5，定容，滅菌后倒入平皿，凝固后利用接種環進行劃線培養鏈霉菌。本發明原料少，配制簡單，簡化了產孢培養基的配制方法，成本低廉，中牛蒡根中氨基酸量約占干重的28％，菊糖含量約占干重的34％，且牛蒡中多種微量元素，其與放線菌培養基高氏一號培養基比較，鏈霉菌能夠快速增殖，產孢質量好，通過生物抑菌活性測定表明，在本發明培養基中生長的鏈霉菌抑制金黃色葡萄球菌和紅酵母的生物活性明顯優于高氏一號培養基。

技術領域

本發明屬于微生物固體培養技術領域，具體的說，涉及一種牛蒡根固體鏈霉菌產孢培養基及其應用。

背景技術

鏈霉菌是抗生素來源的重要生物資源，具有復雜的生長繁殖過程，在其代謝過程中可以產生多種抗菌活性天然產物。在實驗室研究及抗生素生產過程中需要對鏈霉菌進行培養，獲得豐富的孢子，以及篩選可以產生生物活性物質的菌株，滿足生產及科研的需求。

牛蒡(Arctium lappa)屬菊科牛蒡屬，二年生草本植物，又名東洋參、大力子等，是中國傳統藥食同源的植物，而且牛蒡的收獲期長，耐貯藏。牛蒡在我國種植歷史較久，分布廣泛，產量較高，在歐洲、北美也有幾百年的牛蒡藥用歷史。目前，牛蒡的經濟價值主要體現在牛蒡根作為一種新特蔬菜出口日本、韓國以及歐洲許多國家。

牛蒡中含有豐富的營養成分，牛蒡根呈紡錘形，肉質而直立。目前，從牛蒡根中發現的活性成分主要有氨基酸類、微量元素、糖類、多酚類(咖啡酸、綠原酸等)、炔類、揮發油、黃酮類、糖苷類、生物堿、牛蒡苦素、丁二酸、齊墩果酸、熊果酸、胡蘿卜苷等。其應用前景廣闊，可對其進行進一步開發，生產出具有高附加值的產品。將牛蒡根用于微生物培養，可以有效的拓寬牛蒡根的用途，提高牛蒡根的利用價值。

發明內容

本發明涉及一種牛蒡根固體鏈霉菌產孢培養基及鏈霉菌培養的方法，提高牛蒡的利用價值。

一種牛蒡根固體鏈霉菌培養基，其特征在于：包括牛蒡根20～30g/L、甘露醇15～25g/L、瓊脂粉15～20g/L和水。所述牛蒡根固體鏈霉菌培養基的方法，其特征在于，包括以下步驟：將牛蒡根烘干，稱取干牛蒡根，粉碎后，加入水煮沸，紗布過濾，濾液與甘露醇、瓊脂粉混合，用NaOH調節pH值至7.0～7.5，定容，滅菌后倒入平皿，凝固后使用。

應用所述一種牛蒡根固體鏈霉菌培養基的方法，其特征在于，利用接種環沾取鏈霉菌進行劃線，將鏈霉菌產孢平皿置于恒溫培養箱中培養，得到鏈霉菌孢子。

更具體的：一種牛蒡根固體產孢培養基培養鏈霉菌的方法，包括以下步驟：產孢培養基的配制：將牛蒡根洗凈，置于烘箱中80℃烘干，稱取20～30g干牛蒡根，用粉碎機粉碎，加入15～25g甘露醇，加入600～800ml水充分混勻后，利用NaOH調節pH至7.0～7.5，加入15～20g瓊脂粉，最后加水定容至1L體積，滅菌后分裝至平皿中，凝固后使用。

鏈霉菌孢子的培養：取鏈霉菌菌種，用無菌接種環在牛蒡根固體培養基中劃線培養，得到豐富的鏈霉菌孢子。

進一步地，所述培養基滅菌具體為：103.4KPa，121℃高壓蒸汽滅菌30min。

進一步地，所述牛蒡根固體鏈霉菌產孢培養基培養鏈霉菌的方法，其特征在于，所述鏈霉菌培養溫度為25～30℃。

進一步地，所述的牛蒡根固體鏈霉菌產孢培養基培養鏈霉菌的方法，其特征在于，所述鏈霉菌培養時間為5～10天。