[發明專利]一種使用毛細管電泳-質譜聯用檢測獨腳金內酯類似物的方法

有效

• 申請號: 201810817102.0
• 申請日: 2018-07-24
• 公開（公告）號: CN109115903B
• 公開（公告）日: 2019-05-10
• 發明（設計）人: 蔣湘寧;王午豪;齊芪;蓋穎
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京律遠專利代理事務所(普通合伙) 11574
• 代理人: 全成哲

本發明提供一種使用毛細管電泳?質譜聯用檢測獨腳金內酯類似物的方法，所述方法為將獨腳金內酯類似物溶液在毛細管電泳?質譜聯用儀中上樣檢測，其特征為：(1)采用5?15kV的電壓在毛細管電泳?質譜聯用儀中電泳，選用75μm內徑的色譜柱，采用乙酸銨溶液作為緩沖液，添加乙酸銨的50％甲醇作為鞘流液；(2)使用Chemstation對色譜圖進行分析，得到色譜峰；(3)使用Data Analysis對質譜圖進行分析，得到質譜圖，通過該圖分析子離子信息。所述方法可以高效的檢測獨腳金內酯類似物，且色譜峰型良好，出峰速度快，所述方法具有樣品用量小、操作便捷、檢測時間短、價格低廉、樣品無需衍生化等優點。

技術領域

本發明涉及獨腳金內酯類似物的檢測方法，具體為采用毛細管電泳-質譜聯用法檢測獨腳金內酯類似物的方法。

背景技術

獨腳金內酯(Strigolactones)是近年來發現的一種新型植物激素，作為一種產生于植物根部的類胡蘿卜素衍生物，被稱作第七種植物激素。它能夠與生長素和細胞分裂素協同抑制植物的分枝和側芽的生長、誘導叢枝真菌菌絲分枝、促進植物和土壤微生物的共生作用。另外，在植物與其寄生植物相互作用的過程中，獨腳金內酯還起到信號分子的作用，它可以誘導寄生植物如獨腳金屬、列當屬種子的萌發。

獨腳金內酯具有非常廣泛的應用前景，然而很難從植物中提取大量天然的獨腳金內酯，人們從而轉向通過化學合成的方法得到人工獨腳金內酯。其中以GR24最為出名，是首個最為有效的人工合成獨腳金內酯類似物，結構式如下圖。其能夠促進多種根寄生植物種子萌芽，也可以調控植物的分枝，還具有調控叢枝真菌菌絲分枝，調控小立碗蘚擴張等功能。其生物活性原理已經被證實與獨腳金內酯相同，是通過調控植物的生長素合成的方式來控制植物發育。

早期檢測獨腳金內酯類似物GR24的技術是以氣相色譜-質譜聯用為主，然而由于獨腳金內酯自身的化學特性不穩定，在氣相前處理衍生化的過程中容易損失掉大量成分，導致檢測精度下降。目前科學界常用的檢測手段是利用高效液相色譜-質譜聯用法，該方法對比傳統的氣質聯用法，樣品無須經過前處理，對于受熱易分解的樣品比較適合，應用范圍更廣，但是存在樣品用量大、檢測耗時、單針檢測昂貴等缺點。

因此需要一種精度高、快速、且成本低的獨腳金內酯類似物的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種使用毛細管電泳-質譜法檢測獨腳金內酯類似物的方法。

本發明采用了如下技術方案：

一種使用毛細管電泳-質譜聯用檢測獨腳金內酯類似物的方法，所述方法為將獨腳金內酯類似物溶液在毛細管電泳-質譜聯用儀中上樣檢測，其特征為所述方法：

(1)采用5-15kV的電壓在毛細管電泳-質譜聯用儀中進行電泳，選用75μm內徑的色譜柱，采用乙酸銨溶液作為緩沖液，使用添加乙酸銨的50％甲醇作為鞘流液；

(2)使用Chemstation對色譜圖進行分析，得到所述獨腳金內酯類似物色譜峰；

(3)使用Data Analysis對質譜圖進行分析，得到所述獨腳金內酯類似物質譜圖和所述獨腳金內酯類似物的子離子信息。

進一步的，所述步驟(1)中采用20mmol乙酸銨溶液作為緩沖液。

進一步的，所述步驟(1)中選用75μm內徑未涂層熔融石英毛細管作為色譜柱。

進一步的，所述步驟(1)中使用50％甲醇加入1％乙酸銨作為鞘流液。

進一步的，所述步驟(1)選用8kV作為分離電壓。

優選的，一種使用毛細管電泳-質譜聯用檢測獨腳金內酯類似物的方法，所述方法的特征為：