[發明專利]一種中藥復方中土槿皮的鑒別方法

有效

• 申請號: 201810729005.6
• 申請日: 2018-07-04
• 公開（公告）號: CN108896695B
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 曾利杰;陳麗斯;江濤;彭紅英;陳曉堅;楊濱賓;程君璐;劉敏珊;蘇銳輝
• 申請（專利權）人: 廣州白云山敬修堂藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/94
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文;宋靜娜

本發明公開了一種中藥復方中土槿皮的鑒別方法，包括以下步驟：(1)將樣品加到聚酰胺柱上，先用混合溶液洗脫，再用有機溶劑A洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用有機溶劑A溶解，作為供試品溶液；(2)取土槿皮對照藥材，加有機溶劑B處理，濾液蒸干，殘渣用有機溶劑B溶解，作為對照藥材溶液；(3)取供試品溶液與對照藥材溶液各2～6μL，分別點樣于同一硅膠薄層色譜板上，以環己烷?乙酸乙酯的混合溶液作為展開劑，展開，取出，晾干，置于365nm紫外光燈下檢視。本發明鑒別方法能有效清除供試品中雜質，同時主成分損失較小，得到供試品溶液色譜圖斑點清晰易辨，且避免使用苯等毒性較大的試劑，具有專屬性強、重現性好、靈敏度高和綠色環保等優點。

技術領域

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體涉及一種中藥復方中土槿皮的鑒別方法。

背景技術

復方土槿皮酊為中藥復方制劑，收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥成方制劑第17冊，標準號為：WS3－B－3269－98，具有殺菌止癢的功效，用于趾癢、皮膚滋癢、一般皮癬。其處方由土槿皮42g、苯甲酸125g、水楊酸62.5g三味組成，制法：以上三味，取土槿皮，加入適量乙醇，加熱回流5小時，濾過；將苯甲酸、水楊酸用乙醇溶解，與土槿皮濾液合并，加乙醇制成1000ml，即得。

復方土槿皮酊質量標準中薄層鑒別的技術方案為：取本品2ml作為供試品溶液。另取土槿皮對照藥材2g，加乙醇50ml，加熱回流5小時，取回流液2ml，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，先以乙醚展開至前沿，取出，晾干，再以甲醇-濃氨試液(4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于110℃下烘15分鐘。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。孫紅英等(復方土荊皮配質量標準研究，現代應用藥學,1995,8:18-20.)對土槿皮酊中土荊乙酸的薄層鑒別技術方案為：取復方土荊皮酊20ml，揮干，殘渣用苯適量溶解。濾過得苯液，將苯揮去，殘渣用乙醚20ml分三次溶解，乙醚溶解部分置分液漏斗中，用5％碳酸氫鈉液30ml分三次萃取，所得萃取液合并后，加鹽酸酸化成酸性使多量白色沉淀析出，濾液繼續酸化至白色沉淀完全析出，合并沉淀物，用水洗，抽干，以無水乙醚溶解得醚液，揮去乙醚，殘渣用甲醇1ml溶解，作為供試品溶液。取土荊皮乙酸對照品，加甲醇1ml使成1ml含1mg的溶液。取對照品土荊乙酸、供試品溶液各20μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，點樣后放入層析缸內飽和30分鐘后展開。揮盡溶劑后，噴以茴香醛-濃硫酸溶液。在105℃烘約10min。觀察顯色斑點，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

復方土槿皮酊質量標準中的薄層鑒別方法對復方土槿皮酊進行檢驗，檢驗結果表明，同一批次供試品色譜與對照藥材色譜相應位置上，沒有斑點或斑點不清晰，影響結果判定或誤判產品質量不合格。究其原因是：①供試品溶液中化學成分復雜未做提純處理，直接取供試品溶液點樣，對檢測成分造成干擾；②展開劑極性較大，造成展開后薄層斑點Rf過大，斑點容易重疊至溶劑前沿，未能達到有效分離，影響結果判定；③斑點檢視為通用顯色劑硫酸乙醇顯色后日光檢視，因硫酸乙醇溶液噴在薄層板上，對所有機化學成分都會顯同一種顏色，無法區分不同類別的有機化學成分，專屬性差，影響鑒別結果的判斷。而孫紅英等人的鑒別方法中供試品溶液前處理步驟繁瑣，且需用到有毒試劑苯，非常不利于實驗者健康及環境保護。

發明內容

基于此，本發明的目的在于克服上述現有技術的不足之處而提供一種中藥復方中土槿皮的鑒別方法，具有色譜圖斑點清晰易辨、簡單便捷、靈敏度高、鑒別效率高和安全無污染等優點。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：一種中藥復方中土槿皮的鑒別方法，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：將待鑒別的樣品加到聚酰胺柱上，先用乙醚-乙酸丁酯的混合溶液洗脫，再用有機溶劑A洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用有機溶劑A溶解，作為供試品溶液；