[發(fā)明專利]同時測定干血斑中四種抗真菌藥物的試劑盒及其應用

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• 申請日: 2018-07-04
• 公開（公告）號: CN109030672A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發(fā)明（設計）人: 李士敏;袁京群;吳筱丹;葛志偉;朱亞爾;李家睿
• 申請（專利權）人: 易達精準（杭州）科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

本發(fā)明公開了一種同時測定干血斑中四種抗真菌藥物的試劑盒，包括提取液、稀釋液、流動相、標準品和質(zhì)控品；所述標準品包含酮康唑、伏立康唑、伊曲康唑和泊沙康唑；所述提取液由同位素內(nèi)標、水和有機溶劑組成；所述的有機溶劑為甲醇和/或乙腈；所述流動相包括有機相和水相，所述有機相為甲醇和/或乙腈，所述水相為甲酸銨或乙酸銨?甲酸或乙酸水溶液。本發(fā)明還公開了使用所述試劑盒同時測定干血斑中四種抗真菌藥物的方法。本發(fā)明適用于同時檢測干血斑樣品中四種抗真菌藥物的含量，對樣品的檢測專一性強，靈敏度高，穩(wěn)定性好。

技術領域

本發(fā)明涉及臨床檢測領域，尤其涉及同時測定干血斑中四種抗真菌藥物的試劑盒及其應用。

背景技術

近年來，人類感染真菌的概率大幅升高，主要是由器官移植，免疫抑制療法以及艾滋人群增加所導致的。目前，臨床應用最為廣泛的抗真菌藥物主要有酮康唑、伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑，這四種抗真菌藥物具有抗菌活性強、抗菌譜廣、不良反應少等優(yōu)點，廣泛用于淺部及深部真菌病的治療并有較好療效。

雖然抗真菌藥物的效用有了很大的進展，但是真菌感染的發(fā)病率和死亡率依然很高。同時，由于抗真菌藥物的藥代動力學特征、副作用、藥物相互作用和藥物基因組學差異顯著，所以在治療過程中，患者體內(nèi)的血藥濃度個體差異很大。由于治療用劑量低，個體差異大，治療指數(shù)窄，特別對特殊患者(兒童、肝功能不良者)血藥濃度監(jiān)測是非常必要的。

目前，測定抗真菌藥物的方法主要有微生物法、HPLC法和LC-MS/MS法等。由于生物分析法測定伊曲康唑的血藥濃度特異性差，誤差大，而高效液相色譜-紫外或熒光檢測存在樣品前處理復雜往往需要萃取，衍生化等步驟、分析時間長、靈敏度低等缺點。高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術作為近年來發(fā)展起來的分離技術，與傳統(tǒng)的液相色譜相比具有更高的分離效率和更快的分離速度。

公開號為CN106018581A的中國專利文獻公開了一種測定血漿中氟曲馬唑濃度的方法，采用液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)測定，先取待測樣品，加入一定量的有機溶媒液液萃取劑進行液液萃取，預處理后，經(jīng)色譜柱分離，用質(zhì)譜檢測器檢測。

值得注意的是，在一個給藥間期內(nèi)多次采集全血增加了患者，尤其是特殊群體(如兒童、老年人)的生理負擔，也增加了門診患者的單次門診留院時間。另外，移植患者具有各種不同的原發(fā)病，生理、病理狀態(tài)特殊，常合并其他治療藥物，因此對血藥濃度檢測的要求是樣本量少、便捷、準確、特異性高。

干血濾紙片樣品收集技術具有全血樣品無法比擬的優(yōu)勢包括樣本的常溫穩(wěn)定性更好、微創(chuàng)、成本更低、易保存和運輸、減少潛在的病原體感染風險，目前還沒有干血片中免疫抑制劑的檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種同時測定干血斑中四種抗真菌藥物的試劑盒，檢測專一性強，靈敏度高，穩(wěn)定性好。

本發(fā)明提供了如下技術方案：

一種同時測定干血斑中四種抗真菌藥物的試劑盒，包括提取液、稀釋液、流動相、標準品和質(zhì)控品；

所述標準品包含酮康唑、伏立康唑、伊曲康唑和泊沙康唑；

所述提取液由同位素內(nèi)標、水和有機溶劑組成；所述的有機溶劑為甲醇和/或乙腈；

所述流動相包括有機相和水相，所述有機相為甲醇和/或乙腈，所述水相為甲酸銨或乙酸銨-甲酸或乙酸水溶液。

優(yōu)選的，所述的提取液中，水與有機溶劑的體積比為1∶1～9。

進一步優(yōu)選的，所述的提取液由同位素內(nèi)標、水和甲醇組成；水和甲醇的體積比為1∶1～9。

進一步優(yōu)選的，所述的提取液由同位素內(nèi)標、水、甲醇和乙腈組成；水、甲醇和乙腈的體積比為1∶2∶2。

所述的同位素內(nèi)標為氘代伏立康唑、氘代伊曲康唑和氘代泊沙康唑；提取液中，同位素內(nèi)標的濃度為1～100ng/mL。