[發明專利]SPACA1蛋白121位C-33.987在制備重度少弱精診斷試劑中的應用

有效

• 申請號: 201810696656.X
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN110514840B
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 楊靜華;王風芹;陳子江
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發明公開了SPACA1蛋白121位發生?33.987±0.005的質量偏移的半胱氨酸作為生物標志物在制備重度少弱精的診斷試劑中的用途。本發明發現：通過SPACA1蛋白121位發生?33.987±0.005的質量偏移的半胱氨酸的檢驗頻次可以用來診斷重度少弱精癥，為重度少弱精癥提供了新的診斷和治療靶點。

技術領域

本發明涉及醫學和分子診斷技術領域，具體涉及一種SPACA1蛋白121位發生-33.987±0.005的質量偏移的半胱氨酸(非編碼氨基酸SPACA1@121C-33.987)作為標志物在制備重度少弱精診斷試劑中的用途。

背景技術

據世界衛生組織調查，15％的育齡夫婦存在不育問題，不育癥已成為影響人類健康與社會發展的一個全球性醫學和社會問題(Turner,T.T.and J.J.Lysiak,Oxidativestress:a common factor in testicular dysfunction.J Androl,2008.29(5):p.488-98)。如果a級精子數25％，(a+b)級精子數50％，且精子活率低于60％的話就可診斷為弱精子癥。少精子癥是指精液中的精子數目低于正常具有生育能力男性的一種病癥，當男性的精子在每毫升低于2千萬時，就為少精子癥。雖然現今關于少弱精子癥的發病機制的研究很多，但是其確切機制尚不明朗，這也阻礙了其新的治療手段的發展。由于精子成熟后其轉錄和翻譯處于停滯狀態，這就為我們在蛋白質組及其翻譯后修飾水平上研究少弱精子癥的生理病理機制提供了方便。

目前關于精子蛋白質組的研究有很多，總共大約鑒定了6238個非冗余蛋白(Semenproteomics and male infertility，Meritxell Jodar,Ada Soler-Ventura,RafaelOliva，Molecular Biology of Reproduction and Development Research Group，Journal of Proteomics 162(2017)125–134)。目前最新更新的人類精子蛋白質組Amaral等完成，共鑒定了6198個蛋白(Amaral A,Castillo J,Ramalho-Santos J,Oliva R.Thecombined human sperm proteome:cellular pathways and implications for basicand clinical science.Human reproduction update,20(1),40-62(2014))。Mayank等利用差異蛋白質組學的方法在5組健康人和8組少弱精子癥患者的精子細胞中定量了667個蛋白，精漿中定量了447個蛋白，分許出了8個顯著下調蛋白，并對其進行了通路分析(HumanSpermatozoa Quantitative Proteomic Signature Classifies Normo- andAsthenozoospermia，Mayank Saraswat,Sakari Joenvaara,Tushar Jain,Anil KumarTomar,Ashima Sinha,Sarman Singh,Savita Yadav,and Risto Renkonen，Mol CellProteomics.2017Jan；16(1):57-72)。為了研究無精癥的分子機制，Mehdi等利用非標記定量蛋白質組學方法在人阻塞性和非阻塞性無精癥的睪丸組織中找到了520個顯著性變化蛋白，包括幾種關鍵轉錄因子，這也為研究精子發生和人類生殖的分子調控機制奠定了基礎(Quantitative proteomic analysis of human testis reveals system-widemolecular and cellular pathways associated with non-obstructive azoospermia，MehdiAlikhani，MehdiMirzaei，MarjanSabbaghian，PouriaParsamatin，RaziehKaramzadeh，SamaneAdib，NiloofarSodeifi，Mohammad Ali SadighiGilani，MasoudZabet-Moghaddam，LindsayParker，YunqiWu，VivekGupta，Paul A.Haynes，HamidGourabi，HosseinBaharvand，Ghasem HosseiniSalekdeh，Journal of Proteomics，Volume 162,6 June 2017,Pages 141-154)。成熟精子翻譯轉錄活動的沉默也使其成為研究翻譯后修飾的理想細胞模型，但是關于基于質譜的精子翻譯后修飾大規模研究還是很少。關于修飾的研究主要集中于磷酸化，糖基化，乙酰化和泛素化(The Challenge ofHuman Spermatozoa Proteome:A Systematic Review，Kambiz Gilany,Arash Minai-Tehrani,Mehdi Amini,Niloofar Agharezaee,Babak Arjmand，J Reprod Infertil.2017Jul-Sep；18(3):267–279.)。絡氨酸磷酸化對于精子的運動、獲能、超激運動等過程重要作用。Chying-Chyuan Chan等通過對20組正常人和弱精癥患者的精子進行蛋白質組學分析發現有12種包括TUBGCP2在內的蛋白發生了過磷酸化。非編碼氨基酸包括翻譯后修飾和氨基酸突變是調控蛋白功能和結構的重要方式，因此將疾病狀態下異常的或者數量變化極大的非編碼氨基酸作為疾病的生物標志物進而用于診斷疾病的進程具有重要意義。