[發(fā)明專利]用于鴿子基因分型的組合物及其應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810686989.4
• 申請日: 2018-06-28
• 公開（公告）號: CN110656182A
• 公開（公告）日: 2020-01-07
• 發(fā)明（設計）人: 李生斌;伏東科;祝國強;劉松嬌
• 申請（專利權）人: 深圳華大法醫(yī)科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12N15/11
• 代理公司: 11201 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 趙天月

1.一種組合物，其特征在于，包括：STR基因座集和CHD基因，所述STR基因座集包括PIGN15、PIGN10、PIGN57、PIGN26、CliμD16、CliμD32、CliμD19、PIGN12、CliμD17、CliμT17、PIGN04、CliμD11、CliμD35、CliμT02、PG1、PG2、PG4、PG5和PG6。

2.一種引物組，其特征在于，所述引物組適于特異性擴增下列位點：PIGN15、PIGN10、PIGN57、PIGN26、CliμD16、CliμD32、CliμD19、PIGN12、CliμD17、CliμT17、PIGN04、CliμD11、CliμD35、CliμT02、PG1、PG2、PG4、PG5、PG6和性別區(qū)分位點(CHD)。

3.根據權利要求2所述的引物組，其特征在于，包括下列引物：SEQ ID NO:1～SEQ IDNO:40；

任選地，所述引物組中包含多種可檢測標記；

任選地，所述引物組包含第一引物組，第二引物組，第三引物組，第四引物組和第五引物組，各引物組之間的引物帶有不同的可區(qū)分的可檢測標記；

其中所述第一引物組包括用于擴增CliμD11、PG4、PG1和PG2的引物；

所述第二引物組包括用于擴增CliμT02、CliμD17、CliμD35、CliμT17、CliμD16和PIGN04的引物；

所述第三引物組包括用于擴增CliμD32、PIGN57、CHD和PIGN26的引物；

所述第四引物組包括用于擴增PG5、PG6、CliμD19和PIGN12的引物；

所述第五引物組包括用于擴增PIGN15和PIGN10的引物；

任選地，所述可檢測標記包括熒光標記。

4.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒能夠特異性區(qū)分下列位點：

PIGN15、PIGN10、PIGN57、PIGN26、CliμD16、CliμD32、CliμD19、PIGN12、CliμD17、CliμT17、PIGN04、CliμD11、CliμD35、CliμT02、PG1、PG2、PG4、PG5、PG6和性別區(qū)分位點(CHD)；

任選地，所述試劑盒包括權利要求2或3所述的引物組；

任選地，進一步包括等位基因分型標準物，所述等位基因分型標準物包括權利要求1所述組合物中任一個基因座以及CHD基因的純合子DNA。

5.試劑在制備試劑盒中的用途，所述試劑盒用來檢測STR基因座集及CHD基因，所述試劑盒用于鴿子的個體識別和親緣鑒定，所述STR基因座集包括PIGN15、PIGN10、PIGN57、PIGN26、CliμD16、CliμD32、CliμD19、PIGN12、CliμD17、CliμT17、PIGN04、CliμD11、CliμD35、CliμT02、PG1、PG2、PG4、PG5和PG6。

6.一種基因分型方法，其特征在于，包括：

對待測樣品內的STR基因座集以及CHD基因進行擴增，得到經擴增的等位基因，所述STR基因座包括：PIGN15、PIGN10、PIGN57、PIGN26、CliμD16、CliμD32、CliμD19、PIGN12、CliμD17、CliμT17、PIGN04、CliμD11、CliμD35、CliμT02、PG1、PG2、PG4、PG5、PG6；

對所述經擴增的等位基因進行分析，以獲得基因分型結果；

任選地，利用多重擴增反應對所述待測樣品內的STR基因座以及CHD基因進行共擴增，得到經擴增的等位基因；

任選地，所述待測樣品來自于鴿子；

任選地，所述待測樣品來自鴿子的血液、血斑、骨骼或羽毛；

任選地，在進行所述分析之前，還包括對所述經擴增的等位基因進行分離；

任選地，通過毛細管凝膠電泳對所述經擴增的等位基因進行分離；

任選地，使用引物組特異性擴增所述STR基因座以及CHD基因，所述引物組為權利要求2或3所述的引物組。