[發明專利]一種雙相培養基微藻保種技術

在審

• 申請號: 201810650775.1
• 申請日: 2018-06-22
• 公開（公告）號: CN110628639A
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發明（設計）人: 劉軍
• 申請（專利權）人: 劉軍
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12N1/04;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了微藻保種技術鄰域內的一種雙相培養基微藻保種技術，其先將藻種和實驗材料在無菌操作下培養數天，離心收藻，加入新鮮培養基再懸浮至所需密度，備用，再量取適量洛克氏液，上層培養基取動物肝臟適量，切碎成小米粒大小浸入蒸餾水中，置冰箱中過夜，煮沸過濾去渣，補入蒸餾水，得到肝浸液，分別將蛋白胨和葡萄糖加入肝浸液，充分混勻，殺菌后備用，下層固相培養基將營養瓊脂粉、蛋白胨、牛肉浸出粉、NaCl先后加入蒸餾水中，融化后制備，用強堿溶液將PH值調至7.2左右，殺菌后備用，最后將配置好的雙相培養基加入青霉素、鏈霉素后置37^{OC的培養箱培養，澄清無菌后即可使用，充分混勻藻種液，在恒溫培養箱中培養，把相同培養基的上層液相混合到一支培養箱中，隨即保存于4 OC冰箱中，保種；本發明的方法制備方法簡單，操作簡單，不易污染，保種時間較長。}

技術鄰域

本發明涉及一種保種技術，特別涉及一種雙相培養基微藻保種技術。

背景技術

微藻的營養豐富，在人們的生活和生產實踐中具有很廣援的應用，在微藻的培養和應用中，保種技術十分重要，大規模微藻產業僅僅靠培養微藻是不夠的，必須將藻種保存起來備用，才能滿足需要，但微藻個體小，難分離，容易在保種過程中出現藻種單細胞純種隨環境變化發生變異，喪失自身的生理活性和遺傳特性，所以藻種保存就顯得尤為重要困，目前藻種保種方法常采用繼代保種方法，操作重復且繁瑣，不斷傳代過程藻種易污染，保種時間較短。

發明內容

針對現有技術中的缺陷，本發明的目的在于克服上述現有技術中的不足之處，提供一種雙相培養基微藻保種技術，制備方法簡單，操作簡單，不易污染，保種時間較長。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：一種雙相培養基微藻保種技術，所述制備方法包括以下步驟：

（A1）藻種培養：藻種和實驗材料在無菌操作下培養數天，離心收藻，加入新鮮培養基再懸浮至所需密度，備用；

（A2）配置培養基：量取適量洛克氏液，上層培養基取動物肝臟適量，切碎成小米粒大小浸入蒸餾水中，置冰箱中過夜，煮沸過濾去渣，補入蒸餾水，得到肝浸液，分別將蛋白胨和葡萄糖加入肝浸液，充分混勻，殺菌后備用，下層固相培養基將營養瓊脂粉、蛋白胨、牛肉浸出粉、NaCl先后加入蒸餾水中，融化后制備，用強堿溶液將PH值調至7.2左右，殺菌后備用；

（A3）保種：將配置好的雙相培養基加入青霉素、鏈霉素后置37 ^OC的培養箱培養，澄清無菌后即可使用，充分混勻藻種液，在恒溫培養箱中培養，把相同培養基的上層液相混合到一支培養箱中，隨即保存于4 ^OC冰箱中。

本發明首先將藻種和實驗材料在無菌操作下培養數天，離心收藻，加入新鮮培養基再懸浮至所需密度，備用，再量取適量洛克氏液，上層培養基取動物肝臟適量，切碎成小米粒大小浸入蒸餾水中，置冰箱中過夜，煮沸過濾去渣，補入蒸餾水，得到肝浸液，分別將蛋白胨和葡萄糖加入肝浸液，充分混勻，殺菌后備用，下層固相培養基將營養瓊脂粉、蛋白胨、牛肉浸出粉、NaCl先后加入蒸餾水中，融化后制備，用強堿溶液將PH值調至7.2左右，殺菌后備用，最后將配置好的雙相培養基加入青霉素、鏈霉素后置37 ^OC的培養箱培養，澄清無菌后即可使用，充分混勻藻種液，在恒溫培養箱中培養，把相同培養基的上層液相混合到一支培養箱中，隨即保存于4 ^OC冰箱中，保種；與現有技術相比，本發明的有益效果在于：該方法制備方法簡單，操作簡單，不易污染，保種時間較長。

作為本發明的進一步改進，所述強堿溶液為NaOH、KOH、LiOH溶液中的一種

作為本發明的進一步改進，所述恒溫溫度為27 ^OC～37 ^OC。

具體實施方式

實施例1