[發明專利]一種受精培養液及其制備方法

在審

• 申請號: 201810611124.1
• 申請日: 2018-06-05
• 公開（公告）號: CN108624551A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發明（設計）人: 馮懷亮
• 申請（專利權）人: 瑞柏生物（中國）股份有限公司
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種受精培養液及其制備方法，屬于人類輔助生殖技術領域。所述的受精培養液，是將丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、牛磺酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、螯合劑分別以0.01?1.50mmol/L的濃度溶解于含有抗菌素和指示劑的鹽溶液中配制而成。本發明所述的受精培養液是向鹽溶液內添加丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、牛磺酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸營養成分和螯合劑，不僅可以有效地保持精子、卵子和胚胎的活力，而且螯合劑還可以螯合一些非必要的重金屬離子，降低溶液的毒性，不僅能提高輔助生殖技術的成功率，也為輔助生殖技術的安全性提供了有力保證。

技術領域

本發明涉及一種受精培養液及其制備方法，屬于人類輔助生殖技術領域。

背景技術

人類輔助生殖技術中，受精培養液主要應用于人類輔助生殖技術中的精子、卵母細胞培養、體外受精和胚胎培養等流程。目前，臨床使用的常規的受精培養液為僅以碳酸氫鈉為緩沖劑的人輸卵管鹽溶液(HTF)，不能有效地保持精子、卵子和胚胎的活力，尤其會影響精子和卵子的受精能力，導致受精率低。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種各項質控達標的受精培養液，不僅能有效地保持精子、卵子和胚胎的活力，提高輔助生殖技術的受精率和胚胎發育率，也為輔助生殖技術的安全性提供有力保證。

為解決上述問題，本發明所采用的技術方案是：

一種受精培養液，其特征在于：是將丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、牛磺酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、螯合劑分別以0.01-1.50mmol/L的濃度溶解于含有抗菌素和指示劑的鹽溶液中配制而成。

優選的：所述的螯合劑為四元羧酸乙二胺四乙酸。

優選的：所述抗菌素為慶大霉素，濃度為4-12μg/mL。

優選的：所述指示劑為酚紅，濃度4.5-10.0μg/mL。

優選的：所述鹽溶液是以碳酸氫鈉為緩沖劑，以鈉、鉀、鎂、鈣離子為基礎，并以葡萄糖、丙酮酸鈉、乳酸鈉為能量物質的化合物溶液；其中包含：氯化鈉89.00-108.00mmol/L、氯化鉀4.00-6.00mmol/L、硫酸鎂0.10-1.20mmol/L、磷酸二氫鉀0.3-0.6mmol/L、磷酸二氫鈉0.10-0.50mmol/L、氯化鈣1.60-2.50mmol/L、碳酸氫鈉18.00-26.00mmol/L、葡萄糖2.30-3.80mmol/L、丙酮酸鈉0.20-0.60mmol/L、乳酸鈉9.00-23.00mmol/L、磷酸二氫鉀0.20-0.50mmol/L。

優選的：所述鹽溶液中的能量物質還包括白蛋白；所述白蛋白為重組人血清白蛋白，是采用醫療級的重組人血清白蛋白干粉溶解于在鹽水溶液中制備而成，終濃度為0.0-6.0mg/mL。

所述受精培養液的制備方法，包括以下步驟：

1、配制鹽溶液：先按照鹽溶液的各組分用量稱量好各種組分，備用；再將除了抗菌素、指示劑、碳酸氫鈉以外的各組分溶于超純注射級用水中，溶解過程中遵循先固體后液體的原則；所述超純注射級用水經0.1-0.2μM濾膜過濾，內毒素＜0.015EU/mL；然后，依次加入稱量好的抗菌素、指示劑、碳酸氫鈉，制得鹽溶液；

2、檢測步驟1所得鹽溶液的滲透壓和pH值，并記錄最終滲透壓和pH值；所述滲透壓保持為270-290mOsm/Kg，所述pH值保持為7.30-7.80；

3、將丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、牛磺酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、螯合劑分別以0.01-1.50mmol/L的濃度溶解于鹽溶液中，到充分溶解止；

4、將步驟3所得溶液經過0.2μm濾膜過濾滅菌后，取樣測試；測試參數：

A、20-30℃條件下pH值：7.30-7.80；