[發(fā)明專利]酯型兒茶素吡咯烷生物堿及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810589928.6
• 申請日: 2018-06-08
• 公開（公告）號: CN108530430B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鮑官虎;程劍
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07D405/04
• 分類號: C07D405/04;A61K31/4025;A61P3/10;A61P9/10;G01N30/02
• 代理公司: 合肥興東知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

1.酯型兒茶素吡咯烷生物堿的制備方法，其特征在于，酯型兒茶素吡咯烷生物堿由式Ⅰ或式Ⅱ或式Ⅲ或式Ⅳ或式Ⅴ或式Ⅵ所示結(jié)構(gòu)表示：

酯型兒茶素吡咯烷生物堿的制備方法，包括以下步驟：

(1)原料粉碎

取大葉茶，所述大葉茶選用古樹茶昔歸曬青毛茶或紫鵑綠茶曬青毛茶，對其粉碎處理，得到大葉茶粉末；

(2)浸提、萃取

用石油醚對大葉茶粉末進(jìn)行浸提，過濾得到石油醚浸提濾渣，再用乙酸乙酯對石油醚浸提濾渣進(jìn)行浸提，過濾得到乙酸乙酯浸提濾渣，再用甲醇對乙酸乙酯浸提濾渣進(jìn)行浸提，過濾得到甲醇浸提濾液，甲醇浸提濾液經(jīng)濃縮后溶于甲醇水溶液中，得到浸提產(chǎn)物甲醇水溶液，最后用二氯甲烷對浸提產(chǎn)物甲醇水溶液進(jìn)行萃取，上層為甲醇部位水溶性成分，取甲醇部位水溶性成分，濃縮后得到甲醇部位水溶性成分膏狀提取物；

(3)分離純化

對甲醇部位水溶性成分膏狀提取物進(jìn)行分離純化，得到所述酯型兒茶素吡咯烷生物堿。

2.如權(quán)利要求1所述的酯型兒茶素吡咯烷生物堿的制備方法，其特征在于，分離純化處理包括將甲醇部位水溶性成分膏狀提取物溶解后依次經(jīng)過MCI柱層析、Toyopearl柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析和高效液相色譜柱洗脫。

3.如權(quán)利要求1或2所述的酯型兒茶素吡咯烷生物堿的制備方法，其特征在于，所述大葉茶選用古樹茶昔歸曬青毛茶，分離純化的具體過程為：將甲醇部位水溶性成分膏狀提取物用10％的甲醇水溶液溶解后過MCI柱，MCI柱使用MeOH-H₂O體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集50％甲醇水洗脫得到的組分過Toyopearl柱，Toyopearl柱使用MeOH-H₂O體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集40％甲醇水洗脫得到的組分過Sephadex LH-20凝膠柱，Sephadex LH-20凝膠柱使用MeOH-H₂O體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集50％甲醇水洗脫得到的組分用高效液相半制備分離，分離色譜柱為Prep C18柱，流速2毫升/分鐘，洗脫劑為乙腈水，洗脫條件為35分鐘：19％乙腈水等度洗脫，28.761分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅰ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿，30.668分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅱ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿，26.469分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅲ和式Ⅳ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿，33.874分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅴ和式Ⅵ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿。

4.如權(quán)利要求1或2所述的酯型兒茶素吡咯烷生物堿的制備方法，其特征在于，所述大葉茶選用紫鵑綠茶曬青毛茶，分離純化的具體過程為：將甲醇部位水溶性成分膏狀提取物用10％的甲醇水溶液溶解后過MCI柱，MCI柱使用MeOH-H₂O體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集50％甲醇水洗脫得到的組分過Toyopearl柱，Toyopearl柱使用MeOH-H₂O體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集50％甲醇水洗脫得到的組分過Sephadex LH-20凝膠柱，Sephadex LH-20凝膠柱使用MeOH-H₂O體積比0:100到100:0作為梯度洗脫，收集50％甲醇水洗脫得到的組分用高效液相半制備分離，分離色譜柱為Prep C18柱，流速2毫升/分鐘，洗脫劑為乙腈水，洗脫條件為35分鐘：19％乙腈水等度洗脫，28.766分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅰ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿，30.672分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅱ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿，26.471分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅲ和式Ⅳ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿，33.877分鐘洗脫液經(jīng)濃縮干燥后得到式Ⅴ和式Ⅵ所示的酯型兒茶素吡咯烷生物堿。