[發明專利]一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法有效
| 申請號： | 201810580501.X | 申請日： | 2018-06-07 |
| 公開（公告）號： | CN108795883B | 公開（公告）日： | 2022-01-11 |
| 發明（設計）人： | 肖翔;韓雪;劉朝瑩;呂鵬;李潛 | 申請（專利權）人： | 江蘇大學 |
| 主分類號： | C12N7/00 | 分類號： | C12N7/00 |
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| 地址： | 212013 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提高 噬菌體 侵染 細菌 效率 方法 | ||
1.一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）細菌培養，離心收集菌體；細菌為帶有性菌毛的大腸桿菌宿主菌株；
（2）配制納米TiO2材料懸浮液作為母液，超聲并稀釋后待用；所述納米TiO2材料懸浮液的濃度為0.5 mmol/L，所述納米TiO2材料粒徑為20-50 nm；
（3）將步驟（1）中收集的菌體加入到PBS緩沖溶液中，并調節菌濃至初始濃度為2×108CFU/mL；
（4）將噬菌體用PBS緩沖溶液稀釋，調節初始滴度為5×108 PFU/mL；所述噬菌體為絲狀噬菌體；
（5）在離心管中，每管加入步驟（3）中得到菌液、步驟（2）中得到的納米TiO2材料懸浮液、步驟（4）中得到的噬菌體，樣品混勻后靜置孵育。
2.根據權利要求1中所述的一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法，其特征在于，步驟（2）中所述超聲條件為超聲1 h，梯度稀釋后再超聲15 min。
3.根據權利要求1中所述的一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法，其特征在于，所述PBS緩沖溶液濃度為0.01 mol/L，pH為7。
4.根據權利要求1中所述的一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法，其特征在于，步驟（5）中所述菌液、納米TiO2材料懸浮液、噬菌體的體積比為6:1:3。
5.根據權利要求1中所述的一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法，其特征在于，步驟（5）中所述孵育條件為靜置于37℃孵育1 h。
6.根據權利要求1所述的一種提高噬菌體侵染細菌效率的方法，其特征在于，所述噬菌體為M13噬菌體。
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